[发明专利]高效液相色谱-串联质谱测定水产品中盐酸氯苯胍及其代谢物残留量的方法

摘要

本发明公开了一种基于时间分段技术的高效液相色谱‑串联质谱测定水产品中盐酸氯苯胍及其代谢物残留量的方法，步骤是：A.称取水产品肌肉组织，加入乙腈含1%甲酸、无水硫酸镁、ODS提取净化；B.采用高效液相色谱‑串联质谱进行正负离子模式切换和分时间段检测水产品肌肉中盐酸氯苯胍、对氯苯甲酸、对氯苯甲酰胺乙酸的残留量；C.标准曲线法定量：盐酸氯苯胍采用内标法定量，盐酸氯苯胍‑d8作内标，对氯苯甲酰氨基乙酸和对氯苯甲酸采用外标法定量。该方法操作简便，基质效应低、检测限低、准确度和精密度高。

主权项

1.一种基于时间分段技术的高效液相色谱‑串联质谱测定水产品中盐酸氯苯胍及其代谢物残留量的方法，其步骤是：A、肌肉样品进行处理：称取匀质的肌肉样品，加入盐酸氯苯胍‑d₈作为盐酸氯苯胍的内标，依次加入提取剂A、无水硫酸镁涡旋振荡，离心后取上清液，重复提取残留物合并提取液，再加入无水硫酸镁和净化剂B，涡旋振荡并离心，取上清液氮气吹干，残渣用体积比为70:30‑80:20的甲醇和水混合液溶解，经孔径不大于0.22μm的滤膜过滤，滤液供HPLC‑HESI‑MS/MS检测；B、HPLC分析条件：C18色谱柱，100mm×2.1mm，3.5μm；柱温：30℃，流速：0.25mL/min；流动相：有机相为甲醇，水相为0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱程序：起始梯度为体积浓度25％‑35％的甲醇，4.5min内线性增加到体积浓度为85％‑95％的甲醇，保持2.5min，0.1min内线性降低到体积浓度为25％‑35％的甲醇，最后维持0.9min，进样体积为20μL；C、HESI‑MS/MS分析条件：加热电喷雾离子源，正离子模式和负离子模式切换；检测方式采用选择反应监测模式；正离子模式喷雾电压：3500V，负离子模式喷雾电压：‑3000v；蒸发气温度：380℃；鞘气压力50arb；辅助气压力15arb；碰撞气及压力：氩气纯度≥99.999，1.5m Torr；离子传输毛细管温度：350℃；Q1的半峰宽设为0.7，Q3的半峰宽设为0.7，检测参数具体如下：*定量离子D、标准曲线法定量：盐酸氯苯胍采用内标法建立标准曲线，对氯苯甲酸、对氯苯甲酰胺乙酸采用外标法建立标准曲线，并据此计算样品浓度。