[发明专利]构建核酸分子拷贝的方法在审
申请号: | 201880008346.2 | 申请日: | 2018-01-21 |
公开(公告)号: | CN110382710A | 公开(公告)日: | 2019-10-25 |
发明(设计)人: | 迪米特拉·柴瓦希杜 | 申请(专利权)人: | 迪米特拉·柴瓦希杜 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12P19/34 |
代理公司: | 北京同立钧成知识产权代理有限公司 11205 | 代理人: | 关浩;臧建明 |
地址: | 美国德*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 公开了构建连续连接的核酸分子拷贝的方法。连续连接的核酸分子拷贝可用于对相同核酸分子进行数次测序,从而提高测序的总体准确性。连接的核酸分子拷贝可以通过环化5个核酸分子、进行滚环扩增和用包含5‑3外切核酸酶和/或活瓣内切核酸酶活性的切口和聚合酶脱支来构建。 | ||
搜索关键词: | 核酸分子 拷贝 构建 连续连接 测序 内切核酸酶活性 外切核酸酶 滚环扩增 聚合酶 环化 活瓣 可用 | ||
【主权项】:
1.一种构建包含核酸分子拷贝的脱支构建体的方法,所述方法应用于一种或多种核酸分子,并且所述方法包括以下步骤:(i)通过将核酸分子连接至至少一个衔接子来使其环化,所述衔接子包含至少一个切口内切核酸酶识别位点的至少一部分;(ii)进行滚环扩增;(iii)暴露于识别所述识别位点的切口内切核酸酶,使得仅在(ii)中产生的构建体的双链区的一侧产生切口;和(iv)暴露于包含5'‑3'外切核酸酶和/或活瓣内切核酸酶活性的聚合酶。
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