[发明专利]增强的免疫细胞受体测序方法

摘要

公开了用于对来自免疫细胞群的免疫细胞受体库进行测序的方法，以及含有用于免疫细胞受体库测序的引物混合物的试剂盒。

主权项

1.一种用于对免疫细胞受体基因进行测序的方法，其包括(1)提供来自免疫细胞的RNA；(2)(a)任选地将所述RNA转录为互补RNA(cRNA)，然后使用一个或多个包含第一衔接子序列的引物将cRNA逆转录为互补DNA(cDNA)，其中通过逆转录产生的cDNA的每个5’端含有所述第一衔接子序列；(2)(b)如果没有进行步骤(2)(a)，则将所述RNA逆转录为互补DNA(cDNA)，然后使用一个或多个包含第一衔接子序列的引物将cDNA转录为第二链cDNA，其中将cDNA转录为第二链cDNA而产生的cDNA的每个5’端含有所述第一衔接子序列；(3)使用第一引物对扩增cDNA以产生第一扩增产物，所述第一引物对包含与第一衔接子序列杂交的第一引物和与免疫细胞受体基因的恒定区杂交的第二引物；(4)使用第二引物对扩增第一扩增产物以产生第二扩增产物，其中i.第二引物对的第一引物在第二扩增产物的5’端与该衔接子序列结合，ii.第二引物对的第二引物与第二扩增产物中的免疫细胞受体基因的恒定区结合，并且iii.第一和第二引物包含用于测序的衔接子序列；以及(5)对第二扩增产物进行测序。