[发明专利]加帽和未加帽抗体半胱氨酸的大规模生产工艺及其在治疗性蛋白缀合中的应用在审
| 申请号： | 201880010840.2 | 申请日： | 2018-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN110267983A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | K·杜塔;J·M·戈梅斯;F·W·科切;V·B·帕特尔;A·S·普拉沙德;R·L·普罗科皮奥-梅利诺;X·钟 | 申请（专利权）人： | 辉瑞公司 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C07K16/30;A61K47/68 |
| 代理公司： | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人： | 左路;林晓红 |
| 地址： | 美国*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 通过操控细胞生长条件来优化生成选择性加帽和未加帽的抗体上半胱氨酸，包括通过培养基组分、批次处理时间或细胞密度故意耗尽细胞培养过程中的半胱氨酸和/或胱氨酸，实现有效产生蛋白，包括抗体‑药物缀合物(ADC)；缀合TNB‑加帽的含半胱氨酸蛋白，这是通过使其与还原剂反应和经反应性连接部分缀合蛋白上还原二硫键与有效载荷，所述还原剂能从蛋白中分离TNB‑加帽部分，而不显著还原抗体链间二硫键。 | ||
| 搜索关键词： | 加帽 半胱氨酸 蛋白 抗体 缀合 还原剂 大规模生产工艺 细胞培养过程 细胞生长条件 还原二硫键 链间二硫键 选择性加帽 药物缀合物 治疗性蛋白 还原抗体 批次处理 有效载荷 培养基 反应性 胱氨酸 操控 耗尽 细胞 应用 优化 | ||
【主权项】：
1.一种生成能缀合化学有效载荷的含半胱氨酸蛋白的工艺，所述工艺包括以下步骤：(a)用能表达含半胱氨酸蛋白的细胞接种细胞生长培养基，所述培养基包含选自半胱氨酸、胱氨酸和谷胱甘肽的一种或多种生长组分；(b)温育所述细胞达到足以耗尽所述生长培养基中所存在的大部分生长组分的细胞密度；和(c)进一步温育所述细胞以表达具有一个或多个包含游离巯基的未加帽的半胱氨酸残基的含半胱氨酸蛋白。
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