[发明专利]用于在酵母中生产重组IL-11的系统和方法在审
申请号: | 201880014137.9 | 申请日: | 2018-01-15 |
公开(公告)号: | CN110382524A | 公开(公告)日: | 2019-10-25 |
发明(设计)人: | 朱桂林;霍文逊;刘耀南 | 申请(专利权)人: | 南沙生物科技(香港)公司 |
主分类号: | C07K14/54 | 分类号: | C07K14/54;C12N15/81;C12P21/02 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 张全信 |
地址: | 中国香港干诺道*** | 国省代码: | 中国香港;81 |
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摘要: | 重组IL‑11在酵母中表达,然后通过沉淀、在变性剂存在下溶解沉淀并使溶解的蛋白质复性,从需氧发酵培养基中分离。通过阳离子交换和疏水性相互作用色谱进一步纯化复性rhIL‑11,以提供具有高生物活性和低rhIL‑11二聚体和氧化rhIL‑11含量的高度纯化的rhIL‑11。 | ||
搜索关键词: | 酵母 沉淀 溶解 蛋白质复性 阳离子交换 生产重组 生物活性 需氧发酵 培养基 变性剂 二聚体 疏水性 复性 色谱 | ||
【主权项】:
1.产生IL‑11的方法,其包括:将编码重组IL‑11的表达载体引入酵母中,其中所述重组IL‑11不是融合蛋白的形式;在诱导IL‑11表达的条件下在培养基中培养所述酵母;将上清液与所述培养基的固体分离;使所述上清液与足以形成包括沉淀的悬浮液的量的聚乙二醇接触;在包括变性剂的溶液中溶解所述沉淀,以产生粗IL‑11溶液;降低所述变性剂浓度以产生再折叠的IL‑11溶液;使所述再折叠的IL‑11溶液与离子交换介质接触;和从所述离子交换介质洗脱纯化的IL‑11。
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