[发明专利]一种同时测定不同产地穿山龙药材中四种活性成分含量的方法

摘要

本发明公开了一种同时测定不同产地穿山龙药材中四种活性成分含量的方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液制备；(2)供试品溶液制备；(3)高效液相色谱分析：色谱柱：XBridge C18(250mm×4.6mm，5μm)；以乙腈为流动相A，水为流动相B进行梯度洗脱，洗脱程序为：0～5min,5％A；5～15min,5％～15％A；15～55min,15％～45％A；55～65min,45％～100％A；65～80min,100％A；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；检测波长：208nm；柱温：30℃；(4)标准曲线制作；(5)样品含量测定。本发明操作简便、分离快速，使用范围广，可对穿山龙药材、制剂及不同薯蓣属中薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷含量同时测定，为穿山龙和其制剂的质量控制提供了重要的参考依据。

主权项

1.一种同时测定不同产地穿山龙药材中四种活性成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对照品溶液制备：分别精密称取薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷的对照品适量，置于同一个量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，制成每1ml含1mg薯蓣皂苷、1mg伪原薯蓣皂苷、1mg原薯蓣皂苷、1mg甲基原薯蓣皂苷的对照品混合溶液；(2)供试品溶液制备：精密称取穿山龙药材粉末1g，置于具塞锥形瓶中，精密加入30ml甲醇，浸泡10min，称定重量，超声提取3次，每次30min，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，合并提取液减压浓缩，定容至10ml，用微孔滤膜过滤，制成供试品溶液；(3)高效液相色谱分析：采用高效液相色谱法进行测定，具体条件如下：色谱柱：XBridge C18，250mm×4.6mm，5μm；以乙腈为流动相A，水为流动相B进行梯度洗脱，洗脱程序为：0～5min,5％A；5～15min,5％～15％A；15～55min,15％～45％A；55～65min,45％～100％A；65～80min,100％A；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；检测波长：208nm；柱温：30℃；(4)标准曲线制作：精密吸取对照品混合溶液5ml、2.5ml、1.25ml，分别置于10ml的量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，配制成系列对照品混合溶液0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml；按照步骤(3)的色谱条件进样分析，记录色谱峰面积；以对照品混合溶液质量浓度为横坐标(X，mg/ml)，以峰面积为纵坐标(Y)绘制标准曲线，得薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷的回归方程分别为：Y＝2E+06X+11088，R²＝0.9998；Y＝3E+06X+43594，R²＝0.9993；Y＝940645X+23904，R²＝0.9976；Y＝904003X+114.13，R²＝0.9946；(5)样品含量测定：精密吸取供试品溶液，按步骤(3)的色谱条件测定，利用步骤(4)的标准曲线，用外标法以峰面积计算薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷的含量。