[发明专利]人Vγ9Vδ2T细胞的扩增及预处理方法

摘要

本发明公开了一种人Vγ9Vδ2T细胞的扩增及预处理方法。本发明通过在人Vγ9Vδ2 T细胞的扩增培养周期结束时采用纳米硒粒子对扩增的人Vγ9Vδ2 T细胞进行预处理，与常规方法培养的人Vγ9Vδ2 T细胞相比，本发明培养的人Vγ9Vδ2 T细胞具有更强的抗凋亡能力以及靶细胞杀伤能力，对肿瘤的体内生长具有显著抑制作用。所述人Vγ9Vδ2T细胞在肿瘤、难治性传染病及免疫功能失衡的免疫细胞治疗中均具有非常广阔的应用前景，因此本发明的人Vγ9Vδ2 T细胞的扩增及预处理方法具有非常广阔的市场前景和极高的产业化价值。

主权项

1.一种人Vγ9Vδ2T细胞的扩增及预处理方法，其特征在于，包括：步骤1、从人体外周血中提取外周血单个核细胞；步骤2、提供人Vγ9Vδ2T细胞刺激扩增培养基，采用所述人Vγ9Vδ2T细胞刺激扩增培养基对所述外周血单个核细胞进行重悬，得到细胞悬液；所述人Vγ9Vδ2T细胞刺激扩增培养基包括人Vγ9Vδ2T细胞培养基以及添加于所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基中的膦酸类化合物；所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基包括基础培养基以及添加于所述基础培养基中的白介素‑2；所述步骤1与步骤2的顺序能够调整或者同时进行；步骤3、将所述细胞悬液接种到细胞培养容器中培养48‑96小时；步骤4、采用所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基对细胞进行换液，后续培养过程均采用所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基进行；步骤5、从所述步骤3开始培养8‑14天后，获得人Vγ9Vδ2T细胞培养体系，在所述人Vγ9Vδ2T细胞培养体系中加入纳米硒粒子处理6‑24小时；步骤6、去除所述人Vγ9Vδ2T细胞培养体系中未被所述人Vγ9Vδ2T细胞吸收的纳米硒粒子。