[发明专利]橘臀纹粉蚧的实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针有效
申请号: | 201910018051.X | 申请日: | 2019-01-09 |
公开(公告)号: | CN109468392B | 公开(公告)日: | 2021-11-12 |
发明(设计)人: | 朱雅君;侯淑玲;刘静远;田沂民;于翠 | 申请(专利权)人: | 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11;C12Q1/686 |
代理公司: | 上海市汇业律师事务所 31325 | 代理人: | 王函 |
地址: | 200125 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种橘臀纹粉蚧的实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针,根据橘臀纹粉蚧的mtDNA中部分基因的序列设计特异性引物PCF3/PCR3和探针PC‑MGB,建立了橘臀纹粉蚧的实时荧光PCR检测方法,以达到快速准确检测鉴定橘臀纹粉蚧,并用于准确区分橘臀纹粉蚧与大洋臀纹粉蚧的目的。 | ||
搜索关键词: | 橘臀纹粉蚧 实时 荧光 pcr 检测 方法 引物 探针 | ||
【主权项】:
1.一种橘臀纹粉蚧的实时荧光PCR检测方法,其特征在于,包括如下步骤:(1) 设计引物和探针;该引物的序列为:上游引物PCF3:5’‑ GATTTTGATTATTAATTCCATCAC ‑3’ , 如SEQ ID NO:6所示序列或其互补链;下游引物PCR3:5’‑ TTGGATTACCATTTCCTAATGG ‑3’ , 如SEQ ID NO:9所示序列或其互补链;该探针的序列为:橘臀纹粉蚧探针PC‑MGB:5’‑ TTGAACACTTTACCCTCCTTTA‑3’, 如SEQ ID NO:10所示序列或其互补链;荧光基团连接在探针的5’末端,淬灭基团连接在3’末端;(2) 提取橘臀纹粉蚧DNA;(3) 采用步骤(1)设计的引物和探针进行实时荧光PCR检测,用以区分橘臀纹粉蚧与大洋臀纹粉蚧。
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