[发明专利]一种低成本、简单快速的糖蛋白N-糖链分析方法在审
申请号: | 201910025081.3 | 申请日: | 2019-01-10 |
公开(公告)号: | CN109633066A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 张勇 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88;G01N30/06 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明提供了一种低成本、简单快速的糖蛋白N‑糖链定量分析方法,它包括如下步骤:(1)糖蛋白加热变性后进行还原烷基化处理;(2)在超滤管中使用PNGase F蛋白酶切除糖肽上的N‑糖链,离心收集N‑糖链;(3)使用亲水作用色谱纯化富集N‑糖链;(4)去除唾液酸后,干燥浓缩;(5)基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析N‑糖链。本发明操作简单、快速,可广泛适用于不同来源的糖蛋白的N‑糖链的分析,分析结果稳定可靠,应用前景广。 | ||
搜索关键词: | 糖链 糖蛋白 低成本 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 亲水作用色谱 蛋白酶 还原烷基化 定量分析 干燥浓缩 加热变性 离心收集 超滤管 唾液酸 分析 富集 糖肽 去除 切除 应用 | ||
【主权项】:
1.一种低成本、简单快速的糖蛋白N‑糖链定量分析的前处理方法,其特征在于,它包括如下步骤:(1)糖蛋白加热变性后进行还原烷基化处理;(2)在超滤管中使用PNGase F蛋白酶切除糖肽上的N‑糖链,离心收集N‑糖链;(3)使用亲水作用色谱纯化富集N‑糖链;(4)去除唾液酸后,干燥浓缩。
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