[发明专利]一种低成本、简单快速的糖蛋白N-糖链分析方法在审

专利信息
申请号: 201910025081.3 申请日: 2019-01-10
公开(公告)号: CN109633066A 公开(公告)日: 2019-04-16
发明(设计)人: 张勇 申请(专利权)人: 四川大学华西医院
主分类号: G01N30/88 分类号: G01N30/88;G01N30/06
代理公司: 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 代理人: 李高峡;张娟
地址: 610000 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 发明提供了一种低成本、简单快速的糖蛋白N‑糖链定量分析方法,它包括如下步骤:(1)糖蛋白加热变性后进行还原烷基化处理;(2)在超滤管中使用PNGase F蛋白酶切除糖肽上的N‑糖链,离心收集N‑糖链;(3)使用亲水作用色谱纯化富集N‑糖链;(4)去除唾液酸后,干燥浓缩;(5)基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析N‑糖链。本发明操作简单、快速,可广泛适用于不同来源的糖蛋白的N‑糖链的分析,分析结果稳定可靠,应用前景广。
搜索关键词: 糖链 糖蛋白 低成本 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 亲水作用色谱 蛋白酶 还原烷基化 定量分析 干燥浓缩 加热变性 离心收集 超滤管 唾液酸 分析 富集 糖肽 去除 切除 应用
【主权项】:
1.一种低成本、简单快速的糖蛋白N‑糖链定量分析的前处理方法,其特征在于,它包括如下步骤:(1)糖蛋白加热变性后进行还原烷基化处理;(2)在超滤管中使用PNGase F蛋白酶切除糖肽上的N‑糖链,离心收集N‑糖链;(3)使用亲水作用色谱纯化富集N‑糖链;(4)去除唾液酸后,干燥浓缩。
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