[发明专利]一种用萝卜苷生产高纯度莱菔素的方法

摘要

本发明属于生产莱菔素的技术领域，特别涉及一种用萝卜苷生产高纯度莱菔素的方法。本发明方法以萝卜苷、黑芥子酶、透析膜管为原料，经萝卜苷反应液配制、反应体系制备、透析反应、反渗透浓缩、离心萃取等步骤生产得到莱菔素。本发明方法引入透析膜管进行透析反应，实现了产物与底物、酶的原位分离，显著提高了萝卜苷降解率，实现了黑芥子酶的完全截留，可重复用于莱菔素的生产。本发明方法具有生产工艺简单、稳定、易于组织放大，产品收率高，设备投资成本低，生产成本低，资源综合利用率高，环境友好等特点。采用本发明方法制备出的莱菔素具有纯度高、无溶剂残留、性能稳定等特点，可广泛应用于医药、食品和日化等行业。

主权项

1.一种用萝卜苷生产高纯度莱菔素的方法，其特征在于具体方法步骤如下：（1）制备萝卜苷反应液以市售的萝卜苷为原料，按照萝卜苷的质量︰纯化水的体积比为1 g︰300～800 mL的比例，将萝卜苷加入到纯化水中，再用质量分数为5～10%的硫酸溶液调节pH至3.0～4.5，搅拌均匀后，收集溶液备用，即为萝卜苷反应液，用作下一步处理；（2）制备萝卜苷‑黑芥子酶‑透析膜管反应体系以市售的黑芥子酶为原料，按照黑芥子酶︰萝卜苷的质量比为1︰1000～5000的比例，将黑芥子酶缓慢加入到萝卜苷反应液中，搅拌均匀后，即为萝卜苷‑黑芥子酶反应体系，收集备用；以市售截留分子量为200Da或250Da的透析膜管为原料，按照透析膜管的容量︰萝卜苷‑黑芥子酶反应体系的体积比为1︰0.3～0.6的比例，将萝卜苷‑黑芥子酶反应体系装于一端已用重配膜夹封闭的透析膜管中，然后将另一端也用重配膜夹封闭，就制备出萝卜苷‑黑芥子酶‑透析膜管反应体系，用作下一步处理；（3）制备莱菔素粗液第（2）步完成后，按照保温层析柱︰第（2）步制备出的萝卜苷‑黑芥子酶‑透析膜管反应体系的体积比为1︰0.3～0.5的比例，先将萝卜苷‑黑芥子酶‑透析膜管反应体系置于保温层析柱中，然后升温至25～35℃，就组装出透析膜管反应器，备用；再用质量分数为5～10%的硫酸溶液将纯化水调节至与第（1）步收集的萝卜苷反应液相同的pH，收集酸性纯化水；然后再将酸性纯化水泵入透析膜管反应器中，在酸性纯化水的泵入速度为透析膜管反应器体积的1～3倍/小时下，进行连续透析反应，直至流出液中无莱菔素为止，分别收集透析膜管反应器流出液和反应后的透析膜管反应器；对于收集的透析膜管反应器流出液，即为莱菔素粗液，用作下一步处理；（4）制备莱菔素浓缩液第（3）步完成后，将第（3）步收集的莱菔素粗液泵入反渗透浓缩器中，在0.08～0.15MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的1～5%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液；对于收集的反渗透截留液，即为莱菔素浓缩液，用作下一步处理；（5）制备高纯度莱菔素第（4）步完成后，按照第（4）步收集的莱菔素浓缩液︰乙酸乙酯或正己烷的体积比为1︰2～4的比例，将收集的莱菔素浓缩液与乙酸乙酯或正己烷以错流方式泵入离心萃取机中，流速分别为30～50mL/min，离心萃取结束后，分别收集水相和油相；对于收集的油相，泵入到真空浓缩器中，在真空度为0.08～0.095MPa、温度为30～40℃条件下，进行真空浓缩，待无蒸发液成滴流出时继续浓缩3～6小时后停止，分别收集真空浓缩蒸发液和真空浓缩浓缩液；对于收集的真空浓缩浓缩液，即为高纯度莱菔素；萝卜苷降解率为92.7～95.1%，莱菔素收率为95.3～97.9%；莱菔素纯度为94.1～95.6%，无溶剂残留，在温度为‑18℃下储存半年未发生降解。