[发明专利]黄芪甲苷人工抗原及其人工抗体的制备方法和应用

摘要

本发明报道了一种黄芪甲苷的人工抗原及其高特异性人工抗体的制备方法。首先用2,2,6,6‑四甲基哌啶‑1‑氧自由基(TEMPO)氧化法将黄芪甲苷分子中葡萄糖基上C6”‑CH2‑OH选择性氧化成‑COOH，然后再将所得的‑COOH与BSA上的氨基缩合得到人工抗原；最后用所得的人工抗原免疫动物成功制备出多克隆抗体，该抗体的效价大于1:128000，对黄芪甲苷的IC50为9.89μg/mL。进一步使用5个黄芪甲苷结构类似物测定了抗体的交叉反应率，结果表明，较之传统的高碘酸钠法制备的人工抗体，本发明采用的TEMPO法制备的人工抗体的特异性更高，可用于黄芪甲苷的ELISA分析。这一工作为黄芪甲苷及的高选择半抗原设计和人工抗体制备提供了一种新办法。

主权项

1.一种黄芪甲苷人工抗原，其特征在于，将黄芪甲苷分子中葡萄糖基上C6”‑CH₂OH选择性氧化成C6”‑COOH从而制备出黄芪甲苷半抗原，然后通过黄芪甲苷半抗原分子中的‑COOH与载体蛋白分子中的‑NH₂缩合而成完全抗原，其结构式为：