[发明专利]一种胎盘血NK细胞的培养方法在审
申请号: | 201910043435.7 | 申请日: | 2019-01-17 |
公开(公告)号: | CN109504658A | 公开(公告)日: | 2019-03-22 |
发明(设计)人: | 周海涛 | 申请(专利权)人: | 药鼎(北京)国际细胞医学技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 赵丽娜 |
地址: | 101300 北京市顺义区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及细胞培养领域,特别涉及一种胎盘血NK细胞的培养方法,包括以下步骤:包被有CD16单抗的培养容器中接种由胎盘血分离得到的PBMC细胞,培养,培养体系是以VIVO‑15基础培养基为基础添加以下成分:FBS、IL‑2、IL‑12、IL‑15;培养4‑4.5天后,扩培,扩培所用的培养体系是在GT‑T581基础培养基的基础上添加以下成分:FBS、IL‑2、IL‑12、IL‑15。本发明提供的胎盘血NK细胞的培养方法,操作易行,成本低廉,得到更多量满足临床使用标准的NK细胞,为胎盘血NK细胞的应用提供良好的基础。 | ||
搜索关键词: | 胎盘血 基础培养基 培养体系 扩培 细胞培养 培养容器 应用提供 包被 单抗 接种 | ||
【主权项】:
1.一种胎盘血NK细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:包被有CD16单抗的培养容器中接种由胎盘血分离得到的PBMC细胞,培养,培养体系是以VIVO‑15基础培养基为基础添加以下成分:以培养体系的体积计,FBS 50±2μL/mL,IL‑2 500±10IU/mL,IL‑12 2.5±0.2ng/mL,IL‑15 20±2ng/mL;培养4‑4.5天,接种于包被有CD16单抗的培养容器中扩培,扩培培养体系是以GT‑T581基础培养基为基础添加以下成分:以扩培培养体系的体积计,FBS 50±2μL/mL,IL‑2 500±10IU/mL,IL‑12 2.5±0.2ng/mL,IL‑1550±2ng/mL;所述扩培至少一次。
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