[发明专利]胎盘血CIK细胞改良的培养方法在审
| 申请号： | 201910045747.1 | 申请日： | 2019-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN109486760A | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 周海涛 | 申请（专利权）人： | 药鼎（北京）国际细胞医学技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 郭新娟 |
| 地址： | 101300 北京市顺义区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种胎盘血CIK细胞改良的培养方法。该方法包括：1)将由胎盘血分离得到的单核细胞接种于包被有CD3抗体及CD28抗体的培养容器中进行培养；培养体系中的细胞因子为IFN‑γ；2)向培养体系中加入IL‑2，IL‑12，IL‑15，CD16抗体；3)换液，新的培养体系中的细胞因子为IL‑2，IL‑12，IL‑15；所述培养体系中的基础培养基为含4％～6％自体血浆的GT‑T581培养基；4)补加IL‑2，培养2～4天后收获细胞。该方法CIK扩增效果好，且活化的CIK占比更高、T‑reg细胞占比更低。 | ||
| 搜索关键词： | 培养体系 胎盘血 细胞因子 改良 基础培养基 细胞 单核细胞 扩增效果 培养容器 自体血浆 培养基 包被 补加 换液 活化 接种 收获 | ||
【主权项】：
1.一种胎盘血CIK细胞改良的培养方法，其特征在于，包括：1)将由胎盘血分离得到的单核细胞接种于包被有CD3抗体及CD28抗体的培养容器中进行培养；培养体系中的细胞因子为IFN‑γ900U/mL～1100U/mL；2)向培养体系中加入IL‑2终浓度为900U/mL～1100U/mL，IL‑12终浓度为1.5ng/mL～2.5ng/mL，IL‑15终浓度为8ng/mL～12ng/mL，CD16抗体终浓度为1.5μg/mL～2.5μg/mL；3)换液，新的培养体系中的细胞因子为IL‑2 900U/mL～1100U/mL，IL‑15 4ng/mL～6ng/mL，IL‑12 1.5ng/mL～2.5ng/mL；所述培养体系中的基础培养基为含4％～6％自体血浆的GT‑T581培养基；4)补加IL‑2 45～55万IU/400ml，培养2～4天后收获细胞。
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