[发明专利]一种锰过氧化氢酶在枯草芽孢杆菌表达体系构建方法有效
| 申请号： | 201910045910.4 | 申请日： | 2019-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN109486777B | 公开（公告）日： | 2021-10-29 |
| 发明（设计）人： | 李正强;王明琦;曹新宇;张闯 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人： | 陈宏伟 |
| 地址： | 130011 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种新的构建锰过氧化氢酶枯草芽孢杆菌工程菌方法，使枯草芽孢杆菌yoqH‑RIK1285‑MnCAT分泌的嗜热锰过氧化氢酶达到0.74mg/L，比现有技术常用的大肠杆菌表达体系提高了48%，且只有少量包涵体产生。同时，不需改变培养温度、转速等条件，培养条件简单；特别是整个表达过程中不需加入诱导剂IPTG，还能够高效地分泌蛋白，极大地节约了发酵成本；具有积极的实用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 过氧化氢酶 枯草 芽孢 杆菌 表达 体系 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种锰过氧化氢酶在枯草芽孢杆菌表达体系构建方法，其特征在于上游引物和下游引物分别为：上游引物：5' GGAATTCCATATGTGGATTTATGAAAAAAAAT3'；下游引物: 5' CCGCTCGAGTTAGTGATGGTGATGGTGATGAAAAATTTTATTGCGGT 3' ；上游引物 5'端CATATG为NdeⅠ酶切位点，保护碱基GGAATTC；下游引物5'端CTCGAG为XholⅠ酶切位点，保护碱基CCG。
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