[发明专利]MdrP突变体的基因、氨基酸、蛋白功能及药物积累活性检测

摘要

本发明属于蛋白质技术领域，公开了一种MdrP突变体的基因、氨基酸、蛋白功能及药物积累活性检测，在含有阳离子(Na+、K+)的Buffer中加入CCCP移除跨膜H+梯度只保留跨膜阳离子梯度驱动蛋白转运，或在buffer中分别加入Monensin或Nigericin移除阳离子梯度只保留跨膜H+梯度来驱动蛋白转运，实现不同驱动作用之间的相对定量对比。本发明明确了MdrP蛋白高度保守氨基酸位点的重要功能，证明了MdrP蛋白是一个H+和Na+驱动的药物外排蛋白；N146是H+结合位点，D223、Q242是Na+、H+竞争结合位点，或可以成为对MFS家族抗药蛋白理解的有利理论支撑。

主权项

1.一种MdrP突变体基因，其特征在于，所述MdrP突变体基因为突变体MdrP‑R71A、MdrP‑R71K、MdrP‑D127A、MdrP‑D127N、MdrP‑D127E、MdrP‑N146A、MdrP‑N146Q、MdrP‑N146D、MdrP‑D223A、MdrP‑D223E、MdrP‑D223N、MdrP‑Q242A、MdrP‑Q242E、MdrP‑T338A、MdrP‑T338S以及MdrP‑Y364A，核酸序列分别为：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15及SEQ ID NO：1。