[发明专利]高酪蛋白日粮诱导断奶仔猪营养性腹泻模型的建立方法

摘要

本发明涉及一种断奶仔猪营养性腹泻模型，具体涉及高酪蛋白日粮诱导的断奶仔猪营养性腹泻模型，属于动物模型构建领域。给21日龄断奶仔猪持续饲喂15天高酪蛋白日粮，高酪蛋白日粮中酪蛋白是唯一的蛋白来源，酪蛋白的添加量为33.72%，日粮中粗蛋白含量为30%，试验结束后测定仔猪腹泻指标、血清生化指标、肠道结构形态及肠道水通道蛋白标记分子和紧密连接蛋白标记分子表达量。本发明采用了酪蛋白作为唯一蛋白来源，并确定了酪蛋白在日粮中的添加量，建立高酪蛋白日粮诱导的断奶仔猪营养性腹泻模型，为深入探索和预防新生动物发生断奶腹泻提供可靠的模型。

主权项

1.高酪蛋白日粮诱导断奶仔猪营养性腹泻模型的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、试验动物及分组：选取21天的断奶仔猪14头，随机分为对照组A和高蛋白组B两组，每组各7头，对照组饲喂粗蛋白水平为17%的日粮，高蛋白组饲喂粗蛋白水平为30%的日粮，转入步骤二；步骤二、试验过程：仔猪在代谢笼持续饲养15天，实验前3天仔猪进行定位预饲期，饲喂常规教槽料，自由饮水，实验第4天开始对照组A仔猪饲喂粗蛋白水平为17%的饲料，高蛋白组B仔猪饲喂粗蛋白水平为30%的饲料，自由采食和饮水；实验结束前一天晚8点对仔猪禁食，实验过程中进行腹泻评分测定，并观察每组仔猪肛门周围卫生和健康状况；步骤三、试验结束后的指标测定（1）生猪生长性能测定：对每只仔猪进行体重称重并记录；（2）血液指标测定：采集仔猪前腔静脉血，按40mg/kg代谢体重给仔猪肌肉注射4%戊巴比妥钠溶液，前腔静脉采10ml，在室温中静置30min‑2h，待血清析出后，4℃，3000rmp离心15min，取上清液于‑80℃保存，然后对上清液进行生化指标的测定；（3）内容物测定：收集回肠和结肠内容物以及粪便进行指标测定，结肠内容物测定短链脂肪酸，回肠内容物测定肠道微生物、粪便测定含水量；（4）肠道分析：试验结束后，解剖每只仔猪，并取空肠、回肠，将空肠和回肠各分为2份，1份用福尔马林固定用于形态结构测定分析，另1份置于液氮速冻后‑80℃保持，用于紧密连接蛋白家族、水通道蛋白基因测定。