[发明专利]一种嵌段聚合物胶束固定化脂肪酶的方法有效
| 申请号： | 201910049847.1 | 申请日： | 2019-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN109706140B | 公开（公告）日： | 2022-08-19 |
| 发明（设计）人： | 殷凤山;孙伯旺;李瑶嘉;王明亮;周钰明;陈方慧;单永祥;顾海亚;王晋阳 | 申请（专利权）人： | 江苏丰山集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/096 | 分类号： | C12N11/096;C12N9/20;C12P13/00 |
| 代理公司： | 苏州简理知识产权代理有限公司 32371 | 代理人： | 朱亦倩 |
| 地址： | 224145 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种嵌段聚合物胶束固定化脂肪酶的方法，包括：二硫代二丙酸经活化剂活化羧基后与透明质酸发生反应制得中间体，中间体经活化剂活化羧基后与聚乳酸‑羟基乙酸发生反应制得嵌段聚合物，将嵌段聚合物溶于去离子水，制得嵌段聚合物胶束溶液；将脂肪酶粉溶于pH＝8.0的磷酸缓冲盐溶液中，搅拌离心，将上清液转移到容量瓶中，用pH＝8.0的缓冲溶液定容后，得到酶促合成氰氟草酯脂肪酶；将聚合物胶束溶液与酶促合成氰氟草酯脂肪酶混合，抽滤后加入去离子水溶解，并用pH＝8.0磷酸盐缓冲液洗至去除多余的脂肪酶，定容到1L的pH＝8.0磷酸盐缓冲液，冷冻干燥得到嵌段聚合物胶束固定化的脂肪酶。本发明工艺简单。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 聚合物 胶束 固定 脂肪酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种嵌段聚合物胶束固定化脂肪酶的方法，其特征在于，包括：配制嵌段聚合物胶束：所述二硫代二丙酸经活化剂活化羧基后与所述透明质酸发生反应制得中间体，所述中间体经活化剂活化羧基后与聚乳酸‑羟基乙酸发生反应制得嵌段聚合物，将嵌段聚合物溶于去离子水，制得嵌段聚合物胶束溶液；配制脂肪酶酶液：将一定量的脂肪酶粉溶于pH＝8.0的磷酸缓冲盐溶液中，5℃下搅拌均匀后，以转速为12000r/min高速离心3min，将上清液转移到容量瓶中，用pH＝8.0的缓冲溶液定容后，得到酶促合成氰氟草酯脂肪酶；脂肪酶的固定化：将聚合物胶束溶液与酶促合成氰氟草酯脂肪酶混合，抽滤后加入去离子水溶解，并用pH＝8.0磷酸盐缓冲液洗至去除多余的脂肪酶，定容到1L的pH＝8.0磷酸盐缓冲液，冷冻干燥得到嵌段聚合物胶束固定化的脂肪酶。
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