[发明专利]一种用于筛选噬菌体的前处理方法

摘要

本发明公开一种用于筛选噬菌体的前处理方法，其特征在于：所述的方法按照以下步骤进行：首先，向处于生长对数期的目标菌株发酵液中按照一定的质量百分比添加海藻酸钠、聚二甲基硅氧烷、低聚异麦芽糖和钠基膨润土，搅拌混匀至完全溶解，然后，利用滴液发生器将上述溶液滴至氯化钙溶液中形成微球，回收微球并将其置于真空冷冻干燥机中干燥，将冻干微球置于噬菌体分离原液中孵育，同时使用磁力搅拌器保持噬菌体分离原液的流动性，回收微球，并将微球置于研钵中，向研钵中加入PBS溶液，研磨至微球溶解在PBS溶液中，将溶解后的溶液过0.22微米孔径滤膜，收集滤过液，滤过液即为为目标菌株的噬菌体富集液。

主权项

1.一种用于筛选噬菌体的前处理方法，其特征在于：所述的方法按照以下步骤进行：首先，向处于生长对数期的目标菌株发酵液中按照质量百分比添加1~1.5%的海藻酸钠、0.1~0.5%的聚二甲基硅氧烷、1~2%的低聚异麦芽糖和1~5%的钠基膨润土，其中钠基膨润土的蒙脱石含量≥85%，搅拌混匀至完全溶解；然后，利用滴液发生器将上述溶液滴至1~2%（w/w）的氯化钙溶液中形成微球，并保持微球粒径大小在3~5 mm，从氯化钙溶液中回收微球并将其置于真空冷冻干燥机中，干燥至含水量低于1%；将冻干微球置于噬菌体分离原液中，冻干微球与噬菌体分离原液的质量体积比为1:1 g/ml，在28~37℃的条件下孵育12小时，同时使用磁力搅拌器保持噬菌体分离原液的流动性；回收微球，并将微球置于研钵中，向研钵中加入PBS溶液，研磨至微球溶解在PBS溶液中，将溶解后的溶液过0.22微米孔径滤膜，收集滤过液，滤过液即为为目标菌株的噬菌体富集液。