[发明专利]一种黄酮类小分子黄芩苷完全抗原的制备方法在审
| 申请号： | 201910064509.5 | 申请日： | 2019-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN109912711A | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 吴小平 | 申请（专利权）人： | 北京测尔康生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765 |
| 代理公司： | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人： | 张清彦 |
| 地址： | 102200 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开一种黄酮类小分子黄芩苷完全抗原的制备方法，包括下述步骤：取黄酮类小分子黄芩苷，溶解于1000μL无水N，N‑二甲基甲酰胺中，依次加入碳二亚酰胺和EDC‑HCl，室温下反应，离心，取上清液待用；取上清液加入复合碳酸盐缓冲溶液，室温下搅拌；将反应液装入透析袋，用pH值为7‑8、离子浓度为0.01‑0.03mol/L磷酸性盐缓冲液透析一周，每天换透析液体2次，透析完毕，分装于离心管后，‑20℃保存。本发明为中药材提供一种完全抗原合成解决方案，方便获得完全抗原后，进行下一步动物进行免疫试验，能够获得关于黄芩苷单克隆抗体或多克隆抗体制备或筛选提供核心解决方案。 | ||
| 搜索关键词： | 完全抗原 黄芩苷 黄酮类 小分子 取上清液 透析 制备 多克隆抗体制备 二甲基甲酰胺 单克隆抗体 复合碳酸盐 缓冲溶液 免疫试验 透析液体 盐缓冲液 离心管 透析袋 亚酰胺 磷酸 分装 碳二 无水 装入 离子 中药材 溶解 合成 筛选 保存 | ||
【主权项】：
1.一种黄酮类小分子黄芩苷完全抗原的制备方法，其特征在于包括下述步骤：(1)取黄酮类小分子黄芩苷40‑50mg，溶解于1000μL无水N，N‑二甲基甲酰胺中；(2)依次加入10‑15mg碳二亚酰胺和15‑25mgEDC‑HCl，室温下反应15‑20h，离心3‑8min，取上清液待用；(3)取上清液加入7‑10ml复合碳酸盐缓冲溶液，每次加入25μl，直到加完为止，室温下搅拌3‑5h；(4)将反应液装入透析袋，用pH值为7‑8、离子浓度为0.01‑0.03mol/L磷酸性盐缓冲液透析一周，每天换透析液体2次，透析完毕，分装于离心管后，‑20℃保存。
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