[发明专利]一种苦楝愈伤组织的培养方法

摘要

本发明提供了一种苦楝愈伤组织的培养方法，步骤如下：对外植体进行预处理；将预处理后的外植体，采用1％次氯酸钠溶液消毒4.5‑5.5min，用无菌水冲洗，最后吸干水分；无菌条件，将无菌外植体切成0.8‑1.2cm长，将其形态学下端放入培养瓶中进行愈伤组织的诱导培养，即得目标所需的愈伤组织；其中，诱导培养基为：MS+1.5mol/L6‑BA+0.5mol/L NAA+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.8g/L PVPK‑60，pH5.8。本发明提供了一种消毒效果好、诱导率高，并且愈伤褐化率低的苦楝愈伤组织培养方法，将为苦楝组织培养的研究奠定坚实的基础，为苦楝的无性繁殖提供技术支持。

主权项

1.一种苦楝愈伤组织的培养方法，其特征在于，包括如下具体步骤：(1)外植体的预处理：选取新鲜的苦楝外植体，并采用洗衣粉冲洗0.8‑1.2min；接着，流水冲洗1.5‑2.5h，直至外植体表面无残留污垢；最后，将其置于超净工作台中，并用75％乙醇溶液浸泡25‑35s，迅速倒出乙醇溶液后，无菌水冲洗4‑6次，备用；(2)外植体的消毒：将预处理后的外植体，采用1％次氯酸钠溶液消毒4.5‑5.5min，再用无菌水冲洗4‑6次，最后用无菌滤纸吸干水分，即得接种所需的无菌外植体；(3)愈伤组织的培养：在无菌条件，将步骤(2)中所得的无菌外植体切成0.8‑1.2cm长，接着，将其形态学下端直接放入培养瓶中进行愈伤组织的诱导培养，培养15‑20天，即得目标所需的愈伤组织；其中，培养瓶中添加的诱导培养基为：MS+1.5mol/L6‑BA+0.5mol/L NAA+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.8g/L PVPK‑60，pH5.8；培养条件为：培养温度25±1℃，光照时间14‑16h/d，光照强度1500‑2000Lx。