[发明专利]分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体在审
| 申请号： | 201910077029.2 | 申请日： | 2019-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN109880810A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 史百鸣;王运龙;卢雪峰;李国莹;陆瑞琪 | 申请（专利权）人： | 江苏一鸣生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/645 |
| 代理公司： | 苏州国卓知识产权代理有限公司 32331 | 代理人： | 明志会 |
| 地址： | 225432 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体，其采用以下培养基：LB培养基、YPD培养基、YNB培养基、固体培养基、发酵培养基。本发明以茂原链霉菌（Streptomyces mobaraensis）来源的谷氨酰胺转氨酶（TGase）及其酶原区（pro）为基础，将酶原区替换为吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）来源TGase的酶原区（pro(S.H)），实现了TGase在食品级安全菌株——解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica po1h）中的高效表达，得到了谷氨酰胺转氨酶的高产菌株。 | ||
| 搜索关键词： | 谷氨酰胺转氨酶 酶原 培养基 突变体 分泌 解脂耶氏酵母 发酵培养基 固体培养基 茂原链霉菌 吸水链霉菌 高产菌株 高效表达 食品级 菌株 替换 安全 | ||
【主权项】：
1.一种分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体，其特征在于， 所述分泌能力提高的谷氨酰胺转氨酶突变体采用以下培养基：LB培养基：Yeast Extract 5，Tryptone 10，NaCl 10；YPD培养基：Yeast Extract 10，Tryptone 20，葡萄糖 20；YNB培养基：YNB 6.7，葡萄糖20；固体培养基则是在液体培养基中加2%的琼脂；发酵培养基：甘油 15，酵母粉 20，氯化铵2.64，磷酸二氢钾 0.32，无水硫酸镁 0.25，维生素B1 3.34×10‑4，调节pH至8.0；酶原区替换高效表达菌株的构建如下：以实验室保留的质粒pET 20b /pro‑TGase为模板，P3和P4为引物进行PCR，通过PCR扩增含有含有TGase的基因片段。
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