[发明专利]一种简单有效的细菌真菌菌落PCR通用程序在审
申请号: | 201910077097.9 | 申请日: | 2019-01-27 |
公开(公告)号: | CN109852712A | 公开(公告)日: | 2019-06-07 |
发明(设计)人: | 汪立平;万红芳;周滟晴;赵帅东 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201306 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种简单有效的细菌真菌菌落PCR通用程序。所述细菌真菌菌落PCR通用程序为,将细菌、真菌分别接种于相应的培养基上进行培养,培养基长出明显肉眼可见的菌落为实验可用菌落;通过机械研磨破碎微生物细胞,在细胞破碎沉淀物中仅加入TE缓冲液后即得到DNA模板,所得DNA模板可直接用于PCR扩增;除引物不同外,细菌、真菌后续PCR扩增的反应体系、反应程序完全相同。本发明方法安全易操作,成功率高,结果可靠,可用于革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、酵母和丝状真菌特定片段的扩增,简化了菌落PCR的步骤,降低了时间成本和经济成本,适合应用于大批量、多类别环境微生物的快速鉴定。 | ||
搜索关键词: | 菌落PCR 通用程序 细菌真菌 培养基 菌落 真菌 可用 细菌 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 破碎微生物细胞 环境微生物 反应程序 机械研磨 经济成本 快速鉴定 肉眼可见 时间成本 丝状真菌 细胞破碎 扩增 引物 酵母 成功率 接种 应用 安全 | ||
【主权项】:
1.一种细菌真菌菌落PCR通用程序,其特征在于,将细菌、真菌分别接种于相应的培养基上进行培养,培养基长出明显肉眼可见的菌落为实验可用菌落;通过机械研磨破碎微生物细胞,在细胞破碎沉淀物中仅加入TE缓冲液后即得到DNA模板,所得DNA模板可直接用于PCR扩增;除引物不同外,细菌、真菌后续PCR扩增的反应体系、反应程序完全相同。
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