[发明专利]一种高抗白蛾质体转Bt基因杨树新品种的获得方法有效
| 申请号： | 201910077185.9 | 申请日： | 2019-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN109628483B | 公开（公告）日： | 2020-03-24 |
| 发明（设计）人： | 张江;武江峰;武玉永;马美琪;徐乐天;常玲;李圣纯 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/29;C12N15/66;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/00 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 杨采良 |
| 地址： | 430062 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，公开了一种高抗白蛾质体转Bt基因杨树新品种的获得方法，把人工改造的Bt‑cry1C基因克隆到山新杨质体转化载体pYY20上，经过酶切验证和PCR验证后，再经测序验证后，获得Bt‑cry1C基因山新杨质体转化载体pYY25；再用金粉包裹pYY25质粒DNA通过基因枪转化法导入山新杨叶绿体基因组中，经壮观霉素筛选后获得多个抗性芽，经Southern blot检验得到2个阳性抗性芽，再经过3轮叶片抗性再生后，获得同质化的转Bt‑cry1C基因山新杨植株。本发明得到的质体转Bt‑cry1C基因山新杨对美国白蛾幼虫是高致死的，由此获得了一种高抗美国白蛾质体转Bt基因杨树新品种。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高抗白蛾 质体 bt 基因 杨树 新品种 获得 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高抗白蛾质体转Bt基因杨树新品种的获得方法，其特征在于，所述高抗白蛾质体转Bt基因杨树新品种的获得方法包括：将Bt‑cry1C基因克隆到山新杨质体转化载体pYY20上，经过酶切、PCR和测序验证后，获得Bt‑cry1C基因山新杨质体转化载体pYY25质粒；用金粉包裹pYY25质粒DNA通过基因枪转化法导入山新杨叶绿体基因组中，经壮观霉素筛选后获得多个抗性芽，经Southern blot检验得到阳性抗性芽，再经过叶片抗性再生后，获得同质化的转Bt‑cry1C基因山新杨植株。
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