[发明专利]一种产多酶的双菌制剂的制备及其应用方法

摘要

一种产多酶的双菌制剂，是由解淀粉芽孢杆菌GUHP‑86与解淀粉芽孢杆菌GZU03制得的，制备方法包括(1)种子液培养基配制和灭菌；(2)配制单一制剂；(3)配制产多酶的双菌制剂。产多酶双菌制剂的应用方法是将烟叶置于密封袋内，分别吸取两种单一制剂用于烟叶，控制产多酶的双菌制剂总体积，又取有糖盐溶液于烟叶中，充分混匀，于培养箱内进行培养，每天定时换气，且当湿度降低时须补加有糖盐溶液。本发明的产多酶的双菌制剂，在烟草发酵过程中能够提高纳豆激酶、蛋白酶和淀粉酶活性，从而提高烟叶品质，不仅大大提高口含烟食用价值，同时还可以强化发酵过程。本发明方法适用于对口含烟品质的改善。

主权项

1.一种产多酶的双菌制剂，其特征在于它是由解淀粉芽孢杆菌GUHP‑86与解淀粉芽孢杆菌GZU03制得的，其制备方法包括以下步骤：(1)种子液培养基配制和灭菌按下面配方配制培养基：胰蛋白胨1.25g/L、酵母提取物0.625g/L、NaCl 6.25g/L、葡萄糖0.625g/L、水1000g；配好后按三角瓶容量的20％分别装入三角瓶，用121℃高压蒸汽灭菌20min，待冷却后分别接入所述解淀粉芽孢杆菌GUHP‑86和GZU03于37℃、180r/min下进行培养18h±2h，得到种子液；(2)配制单一制剂将所得种子液于2℃～5℃、7000～9000r/min下离心10～20min,收集沉淀并用无菌生理盐水洗涤所述沉淀，然后向所属沉淀加入等量的无菌生理盐水,摇匀，分别得到解淀粉芽孢杆菌GUHP‑86和解淀粉芽孢杆菌GZU03的单一制剂；(3)配制产多酶的双菌制剂在使用时分别将两种解淀粉芽孢杆菌单一制剂按照(4～0)∶(0～4)的体积比例取用，得到产多酶的双菌制剂；所述解淀粉芽孢杆菌GUHP‑86已于2016年1月4日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC M 2016003；所述解淀粉芽孢杆菌GZU03已于2018年1月9日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC M 2018762；保藏单位地址是中国武汉，武汉大学，其邮编为430072，电话号码为027‑68754952。