[发明专利]羊传染性胸膜肺炎间接ELISA检测诊断试剂制备方法在审
申请号: | 201910092874.7 | 申请日: | 2019-01-30 |
公开(公告)号: | CN109781973A | 公开(公告)日: | 2019-05-21 |
发明(设计)人: | 文正常;王璇;潘淑惠;吴玙彤 | 申请(专利权)人: | 贵州省畜牧兽医研究所 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/531;C12N15/70;C12N15/31 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人: | 李余江;程新敏 |
地址: | 550005 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明公开了一种羊传染性胸膜肺炎间接ELISA检测诊断试剂制备方法,以羊传染性胸膜肺炎支原体菌株BNCC126187株(Mycoplasma ovipneumoniad)基因组DNA为模板,通过PCR扩增目的基因RPS11,将其克隆到pET28a(+)载体,成功构建了重组质粒pET28a‑RPS11,并转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,通过包涵体诱导表达重组RPS11蛋白并鉴定及纯化。本发明完成了RPS11蛋白的重组表达,制备出特异性较好的选择性免疫抗原,建立的间接ELISA检测方法为羊传染性胸膜肺炎的血清学检测诊断及流行病学调查提供了有效的技术手段。 | ||
搜索关键词: | 传染性胸膜肺炎 间接ELISA检测 制备 诊断试剂 蛋白 流行病学调查 大肠杆菌 感受态细胞 血清学检测 基因组DNA 技术手段 免疫抗原 目的基因 诱导表达 重组表达 重组质粒 包涵体 支原体 构建 菌株 克隆 诊断 转化 成功 | ||
【主权项】:
1.一种羊传染性胸膜肺炎间接ELISA检测诊断试剂制备方法,其特征在于:通过羊传染性胸膜肺炎支原体菌株全基因序列设计引物扩增目的基因RPS11进行克隆,构建重组质粒pET28a‑RPS11,转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,并通过包涵体诱导表达重组RPS11蛋白并鉴定及纯化。
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