[发明专利]一种生物催化合成莱鲍迪苷M的方法在审
申请号: | 201910095402.7 | 申请日: | 2019-01-31 |
公开(公告)号: | CN109750071A | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 贾红华;李艳;陈量量;潘华祎;欧阳平凯 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12P19/56 | 分类号: | C12P19/56;C12N15/70;C12N9/10 |
代理公司: | 南京汇恒知识产权代理事务所(普通合伙) 32282 | 代理人: | 王月霞 |
地址: | 211816 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种生物催化合成莱鲍迪苷M的方法,首先,利用番茄来源UDP‑糖基转移酶和马铃薯来源蔗糖合成酶,以甜菊甙为原料糖基化反应合成莱鲍迪苷E;随后,利用甜叶菊来源UDP‑糖基转移酶和马铃薯来源蔗糖合成酶,以莱鲍迪苷E为原料进一步糖基化反应合成莱鲍迪苷M。本发明的方法利用分子克隆技术,获得异源表达UDP‑糖基转移酶和蔗糖合成酶的大肠杆菌基因工程菌,经发酵产酶后以细胞粗提液直接进行催化反应,利用粗提液中UDP及额外添加的蔗糖在蔗糖合成酶分解作用下获得UDP‑葡萄糖作为糖基化反应的原材料,建立双酶循环反应体系,有效催化甜菊甙生产莱鲍迪苷M。原料成本更为低廉,工艺步骤简单,具有重要的应用价值。 | ||
搜索关键词: | 蔗糖合成酶 糖基转移酶 生物催化合成 糖基化反应 莱鲍迪苷E 粗提液 甜菊甙 马铃薯 大肠杆菌基因工程菌 合成 酶循环反应体系 分子克隆技术 葡萄糖 催化反应 发酵产酶 工艺步骤 基化反应 异源表达 原料成本 甜叶菊 原料糖 蔗糖 催化 番茄 分解 细胞 应用 生产 | ||
【主权项】:
1.一种生物催化合成莱鲍迪苷M的方法,其特征在于,利用分子克隆技术,获得异源表达UDP‑糖基转移酶和蔗糖合成酶的基因工程菌,经自诱导发酵产酶后以细胞粗提液直接进行催化反应,利用粗提液中本身含有的微量UDP及额外添加的蔗糖,建立双酶循环反应体系,有效催化甜菊甙生产莱鲍迪苷M。
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