[发明专利]一种酶法制备莱鲍迪苷E的方法有效
| 申请号： | 201910095404.6 | 申请日： | 2019-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN109750072B | 公开（公告）日： | 2022-04-19 |
| 发明（设计）人： | 李艳;陈量量;贾红华;潘华祎;欧阳平凯 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12P19/56 | 分类号： | C12P19/56;C12N9/10;C12N15/54;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京新慧恒诚知识产权代理有限公司 32424 | 代理人： | 王月霞 |
| 地址： | 211816 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种酶法制备莱鲍迪苷E的方法，该方法利用番茄来源UDP‑糖基转移酶和马铃薯来源蔗糖合成酶，以甜菊甙为原料一步糖基化反应生产莱鲍迪苷E，同时采用定点突变技术，改造UDP‑糖基转移酶，进一步提高莱鲍迪苷E的产率。本发明的方法无需添加UDP‑葡萄糖和UDP，利用粗提液中UDP及额外添加的蔗糖在蔗糖合成酶分解作用下获得UDP‑葡萄糖作为糖基化反应的原材料，建立双酶循环反应体系，有效催化甜菊甙生产莱鲍迪苷E。其中，莱鲍迪苷E产率可达65%以上；后期通过定点突变技术，经筛选获得N358F有益突变体，其催化莱鲍迪苷E产率提高，最高可达85%以上。与已有的莱鲍迪苷E制备方法相比，工艺步骤简单，成本低廉，且产率高，具有重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 法制 备莱鲍迪苷 方法 | ||
【主权项】：
1.一种酶法制备莱鲍迪苷E的方法，其特征在于，利用分子克隆技术，获得异源表达UDP‑糖基转移酶和蔗糖合成酶的基因工程菌，经自诱导发酵产酶后以细胞粗提液直接进行催化反应，利用粗提液中本身含有的微量UDP及额外添加的蔗糖，建立双酶循环反应体系，有效催化甜菊甙生产莱鲍迪苷E；其中，所述UDP‑糖基转移酶为番茄来源糖基转移酶UGTSL2或者其突变体。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京工业大学，未经南京工业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910095404.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
