[发明专利]利用结合HTRF技术的甲基转移酶通用酶活分析法筛选抑制剂/激动剂的方法在审
| 申请号： | 201910116959.4 | 申请日： | 2019-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN109880884A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 张冰洁 | 申请（专利权）人： | 浠思（上海）生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48;G01N21/64;G01N33/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200131 上海市浦东新区中国（*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用结合HTRF技术的甲基转移酶通用酶活分析法筛选抑制剂/激动剂的方法。利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法，该方法包括如下步骤：配制待检测的酶、反应底物、SAM、HTRF Donor的anti‑SAH antibody和偶联HTRF Acceptor的SAH；对待测样品进行系列浓度梯度稀释或固定浓度稀释；在微型板中依次加入酶、待测样品、底物和SAM，反应一段时间；进行HTRF读值与数据处理分析，计算样品IC50或抑制率。本发明的优点在于适用于所有抑制剂、激动剂或反向激动剂的筛选，无论是抗体、蛋白、多肽、小分子化合物或复合分子均可检测。 | ||
| 搜索关键词： | 激动剂 抑制剂 甲基转移酶 通用酶 筛选 数据处理分析 小分子化合物 反向激动剂 待测样品 反应底物 复合分子 浓度梯度 浓度稀释 细胞因子 可检测 微型板 抑制率 检测 底物 多肽 抗体 偶联 稀释 配制 蛋白 分析 | ||
【主权项】：
1.利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：步骤一，配制待检测酶、反应底物、SAM、HTRF Donor的anti‑SAH antibody和偶联HTRF Acceptor的SAH；步骤二，对待测样品进行系列浓度梯度稀释或固定浓度稀释；步骤三，在微型板中依次加入待检测酶、待测样品、反应底物和SAM，反应一段时间；步骤四，加入检测缓冲液，室温孵育10分钟；步骤五，加入HTRF Donor的anti‑SAH antibody和偶联HTRF Acceptor的SAH，室温孵育1小时；步骤六，进行HTRF读值与数据处理分析，计算样品IC50或抑制率。
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