[发明专利]流式抗体及其制备方法和滴定方法有效
| 申请号： | 201910119662.3 | 申请日： | 2019-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN109883932B | 公开（公告）日： | 2021-08-10 |
| 发明（设计）人： | 杨飞;冷毅斌;张念元;王长乐;邓小龙 | 申请（专利权）人： | 武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14 |
| 代理公司： | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人： | 方菲 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市中国（湖北）自贸区武汉片区高新*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种流式抗体及其制备方法和滴定方法，该流式抗体的制备方法包括如下步骤：采用反应缓冲液制备APC溶液；向APC溶液中加入ASE进行封闭反应，得第一中间体；向含第一中间体的反应缓冲液中加入SMCC进行活化反应，得第二中间体；将DTT与IgG或IgM进行还原反应，得还原IgG或还原IgM；将含还原IgG或还原IgM的反应缓冲液与含第二中间体的反应缓冲液混合，过夜反应，加入NEM，反应，即得。该流式抗体的制备方法操作简便，可重复使用，且制成的流式抗体染色指数显著提升，明显减少背景结合，显著提升目标细胞的荧光亮度。 | ||
| 搜索关键词： | 抗体 及其 制备 方法 滴定 | ||
【主权项】：
1.一种流式抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：采用反应缓冲液制备APC溶液；向所述APC溶液中加入ASE，于37±1℃条件下进行封闭反应，得第一中间体；向含所述第一中间体的反应缓冲液中加入SMCC，于37±1℃条件下进行活化反应，得第二中间体；将DTT与IgG或IgM于37±1℃条件下进行还原反应，得还原IgG或还原IgM；将含还原IgG或还原IgM的反应缓冲液与含所述第二中间体的反应缓冲液混合，于4℃条件下，过夜反应，得第三中间体；向含所述第三中间体的反应缓冲液中加入NEM，于37±1℃条件下反应，即得。
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