[发明专利]高纯度乌司他丁及其制备方法和含有乌司他丁的药物组合物

摘要

本发明提供一种乌司他丁及其制备方法，10万单位/ml的乌司他丁在405nm处的吸光度值不超过0.18，人尿激肽原酶的含量不超过0.0005PNAU，重金属含量不超过1.6μg/ml，细菌内毒素含量不超过6.0EU/ml。通过亚硝酸盐、硫酸铵、聚乙二醇、调节pH等方法对尿液进行预处理，同时在过柱前采用透析的方法进行初步的纯化，再依次通过凝胶柱和阳离子交换柱制备得到乌司他丁纯品，大大简化了制备工艺的同时保证成品的纯度和收率，药物活性有很大提升。

主权项

1.一种乌司他丁产品，其特征在于，所述乌司他丁浓度为10万单位/ml时，在405nm处的吸光度值不超过0.18，人尿激肽原酶的含量不超过0.0005PNAU，重金属含量不超过1.6μg/ml，细菌内毒素含量不超过6.0EU；所述乌司他丁采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳测定的分子量为38,769‑40,312Da或采用高效液相色谱法测定的分子量为67,076‑67,750Da；其中，所述乌司他丁产品的制备方法，包括以下步骤：(1)尿液中加入亚硝酸盐，调节pH，搅拌，硫酸铵溶液进行洗脱，洗脱液进行抽滤，保留滤饼；(2)滤饼加水溶解，调节pH，加入聚乙二醇，过滤，沉淀物干燥；(3)步骤(2)沉淀物加水溶解，透析，干燥，即得乌司他丁粗品；(4)乌司他丁粗品加水溶解，过凝胶柱层析，蒸馏水洗脱，收集组分，超滤；(5)步骤(4)样品加入阳离子交换层析柱上样，用盐酸洗脱，收集洗脱液，冷冻干燥，即得乌司他丁产品；其中，所述步骤(4)中凝胶柱层析填料为葡聚糖凝胶G‑75，所述步骤(5)中阳离子交换柱为732型阳离子交换树脂。