[发明专利]一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法

摘要

本发明公开了一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法，特点是包括以下步骤：（1）目标物经水溶液提取后，通过大粒径硅藻土柱可实现水的快速吸附，乙腈作为洗脱液逐级渗入，替换掉水溶液的同时，完成了9种常见注水类药物及代谢物的同步净化、浓缩过程；（2）混合标准溶液组成和基质标准曲线制备；（3）经Hypersile Gold C18色谱柱，乙腈‑水为流动相梯度洗脱，通过采集目标物的高准确度质量数并自动触发二级，从而实现9种目标物的快速筛查；（4）通过基质标准曲线计算待测物浓度，优点是一次前处理完成水溶性药物的同时提取、净化、浓缩过程，检测灵敏度高、重现性、分辨率高且可操作性强。

主权项

1.一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）样品前处理将待测样品按5g：10 mL的比例加入到提取液中，振荡、超声各4‑6 min，4000‑5000 r/min下离心4‑6 min；取8‑12mL水相上填充量为1000 mg的硅藻土柱后平衡5 min，然取10 mL乙腈过硅藻土柱，洗脱2‑3次，收集洗脱液并加入0.5 mL二甲基亚砜，用乙腈定容至20 mL；取出10 mL，氮吹后用纯水定容至1.0 mL，过0.22 μm 滤膜，待分析；（2）混合标准溶液组成和基质标准曲线制备A．混合标准溶液组成：混合标准溶液1包括：0.5 ug/mL肾上腺素、0.5 ug/mL 4‑羟基‑3‑甲氧基‑扁桃酸和1.0 ug/mL 3,4‑二羟基扁桃酸；混合标准溶液2包括：0.01 ug/mL异丙嗪、0.01 ug/mL阿托品、0.01 ug/mL山莨菪碱、0.01 ug/mL东莨菪碱、0.01 ug/mL普鲁卡因和0.01 ug/mL利多卡因；B．基质标准曲线定量：在空白样品中加入上述混合标准溶液1：0 μL，10 μL，20 μL，50 μL，100 μL，加入上述混合标准溶液2：5.0 μL，10 μL，50 μL，100 μL，以浓度为横坐标，仪器响应值为纵坐标，做基质加标标准曲线，作为试样处理液中待测物浓度定量的依据，其中响应值=标准品峰面积/标准品质量；（3）色谱条件与质谱条件A．色谱柱：Hypersile Gold C18，柱温40℃；流动相A：含有0.1%甲酸的水溶液；流动相B：乙腈溶液，梯度见下表1；进样量为10 μL，洗脱总时间为10 min，流动相流速为0.3 mL/min；表1 正、负离子模式HPLC洗脱程序；B．质谱条件：质谱在正/负离子转换模式下进行全扫描测定，质量范围：m/z 100‑500，分辨率70000，自动增益控制目标值5×10⁵；4‑羟基‑3‑甲氧基‑扁桃酸采用负离子模式2700 V，其余成分则采用正离子模式3800 V，离子传输管温度为300 ℃，鞘气压35 arb，辅助气压10 arb，气化室温度350℃；二级采用自动触发模式，分辨率35000， 自动增益控制目标值2×10⁵，碰撞能量范围25%‑40%，保留时间采集范围：根据色谱图中各个目标物质的保留时间值±1.0 min；（4）浓度计算方法样品中待测物的含量根据如下计算公式得到：X=2*C*V/m，式中：X－ 试样中待测物含量，单位为μg/kg；C－ 试样处理液中待测物浓度，根据基质标准曲线计算得到，单位为μg/LV— 定容体积，单位为mL；m－试样体积或质量，单位为g。