[发明专利]大肠杆菌O157:H7的CPA引物及试剂盒和检测方法有效
| 申请号： | 201910131761.3 | 申请日： | 2019-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN109652574B | 公开（公告）日： | 2021-08-10 |
| 发明（设计）人： | 徐振波;骆玉婷;刘君彦;张桂兰;苗健;袁牧;陈玲;苏健裕;李冰;李琳;李晓玺;张霞 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 郭炜绵 |
| 地址： | 511458 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种大肠杆菌O157:H7的CPA引物及其检测试剂盒和检测方法，该针对靶点rfbE设计的CPA引物包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5所示。本发明中所提供的针对E.coliO157:H7特异性靶序列rfbE及stx1所设计的交叉引物恒温扩增反应检测鉴定体系，解决现有技术方法所需周期长，灵敏度低，成本高，现场应用困难等缺陷。通过选择目标菌株的特异性序列rfbE及stx1的保守区域，设计一对剥离引物、交叉引物和特异引物构建交叉引物恒温扩增反应体系，并在60分钟左右获得检测结果以缩短传统大肠杆菌检测的周期。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 o157 h7 cpa 引物 试剂盒 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种大肠杆菌O157:H7的CPA检测引物，其特征在于：是针对靶点rfbE设计的，包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a；其核苷酸序列分别如下所示：靶点rfbE剥离引物4s：5’‑aggaccgcagaggaaaga‑3’(SEQ ID NO.1)；靶点rfbE剥离引物5a：5’‑tccacgccaaccaagatc‑3’(SEQ ID NO.2)；靶点rfbE交叉引物2a1s：5’‑agtacattggcatcgtgtcagataaactcatcgaaaca‑3’(SEQ ID NO.3)；靶点rfbE特异引物2a：5’‑agtacattggcatcgtgt‑3’(SEQ ID NO.4)；靶点rfbE特异引物3a：5’‑ggcatcgtgtggacagggt‑3’(SEQ ID NO.5)。
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