[发明专利]一种改良注射混合液制备及使用方法

摘要

本发明属于注射液技术领域，公开了一种改良注射混合液制备及使用方法。改良的注射混合液按比例由转染脂质体载体、外源质粒和外源miRNAs溶液组成；制备方法包括：将构建的外源质粒使用灭菌的ddH2O稀释浓度为500ng/μL；其次将定制的miRNAs使用灭菌的ddH2O稀释浓度为20pmoL/μL；然后准备转染脂质体载体；并按照转染脂质体载体：Sox9a外源质粒：外源miRNA(可为一种或多种混合物)＝2:1:1的比例配置混合液2～4μL。使用方法采用性腺体外显微注射结合电转染。本发明通过向原有的混合液中添加不同比例和不同种类的外源miRNAs，能够控制6个月斑马鱼精巢和卵巢的分化以及成鱼性腺再生。

主权项

1.一种改良注射混合液，其特征在于，所述改良注射混合液由转染脂质体载体、外源质粒和外源miRNAs溶液组成；按质量比例转染脂质体载体：Sox9a/b外源质粒：外源miRNAs溶液＝＝2:1:1；所述外源miRNAs溶液为外源miR141、外源miR‑734、外源miR430a、外源miR218a中的一种或多种混合物。