[发明专利]一株以甘油为底物生产丁二酸的重组菌及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 201910136750.4 | 申请日： | 2019-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN109652434B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 张学礼;于勇;徐洪涛;刘茹 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/90;C12N1/21;C12N9/12;C12N15/54;C12P7/46;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： |
本发明公开了一株以甘油为底物生产丁二酸的重组菌及其构建方法与应用。本发明为了减少杂质的生成并提高丁二酸的产量，在大肠杆菌中引入了Ⅱ型甘油代谢系统，通过对重组菌Suc‑T11进行分子改造，构建了在厌氧条件下工作的电子传递链，提高了能量的供应能力，进而提高了丁二酸产量。实验证明：本发明构建的重组菌YY‑GS004在批式发酵中，丁二酸产量达到了482.5mM，是其亲本的3.82倍，转化率达到了0.92mol |
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| 搜索关键词： | 甘油 生产 丁二酸 重组 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种重组菌的构建方法，包括如下步骤：对受体菌进行如下(1)‑(3)所述的改造：(1)抑制或降低所述受体菌中甘油激酶glpK的表达量和/或活性或抑制所述受体菌中甘油激酶基因glpK的表达或敲除所述受体菌中的甘油激酶基因glpK；(2)抑制或降低所述受体菌中磷酸烯醇式丙酮酸依赖型二羟基丙酮激酶dhaKLM的表达量和/或活性或抑制所述受体菌中dhaKLM基因簇的表达或敲除所述受体菌中的dhaKLM基因簇；(3)提高所述受体菌中ATP依赖型二羟基丙酮激酶dhaK的表达量和/或活性或增强所述受体菌中ATP依赖型二羟基丙酮激酶基因dhaK的表达；所述受体菌为可以甘油为底物在厌氧条件下发酵生产丁二酸的菌。
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