[发明专利]一种CYP3A5基因rs776746位点多态性核酸质谱检测方法在审
| 申请号： | 201910137670.0 | 申请日： | 2019-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN109652514A | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 田彦捷;武会娟;马凯;刘旭;程湛;魏颖;朱博兰;朱瑞雪;怀雪飞;傅莹茜;张志超;梁丹丹 | 申请（专利权）人： | 北京市理化分析测试中心;北京北基医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 100000 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种CYP3A5基因rs776746位点多态性核酸质谱检测方法，属于单核苷酸多态性检测技术领域，所述方法包括以下步骤：1)以人基因组DNA为模板，用CYP3A5基因rs776746位点引物进行PCR扩增获得扩增产物；2)利用虾碱性磷酸酶对步骤1)中获得的扩增产物进行去磷酸化处理，获得去磷酸化的线性DNA片段；3)对步骤2)中获得的去磷酸化的线性DNA片段进行单碱基延伸获得延伸产物；4)采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法检测步骤3)中所述延伸产物，获得所述CYP3A5基因rs776746位点的多态性分型结果。所述检测方法准确、高效、快速。 | ||
| 搜索关键词： | 去磷酸化 线性DNA片段 位点多态性 扩增产物 延伸产物 质谱检测 核酸 位点 基质辅助激光解析电离 单核苷酸多态性检测 飞行时间质谱法 虾碱性磷酸酶 人基因组DNA 单碱基延伸 多态性分型 检测 引物 | ||
【主权项】：
1.一种CYP3A5基因rs776746位点多态性核酸质谱检测方法，包括以下步骤：1)以人基因组DNA为模板，用CYP3A5基因rs776746位点引物进行PCR扩增获得扩增产物；2)利用虾碱性磷酸酶对步骤1)中获得的扩增产物进行去磷酸化处理，获得去磷酸化的线性DNA片段；3)对步骤2)中获得的去磷酸化的线性DNA片段进行单碱基延伸获得延伸产物；4)采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法检测步骤3)中所述延伸产物，获得所述CYP3A5基因rs776746位点的多态性分型结果；步骤1)中所述rs776746位点引物包括rs776746‑F和rs776746‑R；所述rs776746‑F具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；所述rs776746‑R具有如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列；步骤3)中所述单碱基延伸的延伸引物为rs776746‑E，具有如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。
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