[发明专利]一种携带功能基团O-糖链的制备方法在审

专利信息
申请号: 201910142856.5 申请日: 2019-02-26
公开(公告)号: CN109762035A 公开(公告)日: 2019-05-17
发明(设计)人: 张英;王仲孚;南丽婧;黄琳娟 申请(专利权)人: 西北大学
主分类号: C07H15/20 分类号: C07H15/20;C07H1/00
代理公司: 西安智萃知识产权代理有限公司 61221 代理人: 方力平
地址: 710069 陕西*** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 发明具体涉及一种携带功能基团O‑糖链的制备方法,以全乙酰基保护的半乳糖胺为供体,以无水1,2‑二氯乙烷为溶剂,以三氟甲烷磺酸铜为催化剂,混合后加入受体,反应温度为110‑135℃,反应时间为6‑10h,得O‑糖链的前体类似物,经硅胶柱层析提纯,洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚,展开剂为二氯甲烷和甲醇,提纯后再经细胞吸收,被细胞中酶利用,加工反应合成携带功能基团O‑糖链。该制备方法克服了传统化学法释放糖蛋白O‑糖链的缺陷,且还使糖链带上紫外基团,提高检测灵敏度,降低糖链极性,使糖链在色谱柱上保留,无需进行柱前衍生,便于糖链分离,既能用于糖链的微量分析又能用于糖链的制备,且得到的携带功能基团的O‑糖链还可用于后续糖芯片构建及功能分析。
搜索关键词: 糖链 功能基团 制备 携带 提纯 三氟甲烷磺酸 硅胶柱层析 检测灵敏度 乙酰基保护 半乳糖胺 传统化学 二氯甲烷 二氯乙烷 反应合成 功能分析 糖链分离 微量分析 细胞吸收 乙酸乙酯 柱前衍生 类似物 色谱柱 石油醚 糖蛋白 糖芯片 洗脱剂 展开剂 供体 构建 甲醇 可用 前体 溶剂 无水 催化剂 细胞 释放 保留 加工
【主权项】:
1.一种携带功能基团O‑糖链的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一:制备O‑糖链的前体类似物:以全乙酰基保护的半乳糖胺为供体,以无水1,2‑二氯乙烷为溶剂,以三氟甲烷磺酸铜为催化剂,混合后加入受体,反应温度为110‑135℃,反应时间为6‑10h,得O‑糖链的前体类似物;步骤二:制备携带功能基团O‑糖链:O‑糖链的前体类似物经细胞吸收,被细胞中酶利用,加工反应合成携带功能基团O‑糖链,释放到培养基中;步骤三:从培养基中纯化携带功能基团O‑糖链:利用C18柱纯化,先活化平衡、后上样、经水洗除杂,最后洗脱接样,得到携带功能基团O‑糖链样品。
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