[发明专利]一种恩曲替尼耐药肺癌细胞系的建立方法及其在医药研究中的应用有效
| 申请号： | 201910148094.X | 申请日： | 2019-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN109825477B | 公开（公告）日： | 2022-07-08 |
| 发明（设计）人： | 牛晓敏;陆舜;陈智伟 | 申请（专利权）人： | 上海市胸科医院 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12N1/36;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 杨帆 |
| 地址： | 200030 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种恩曲替尼耐药肺癌细胞系的建立方法及其在医药研究中的应用，属于生物医学技术领域。本发明提供的恩曲替尼耐药肺癌细胞系的建立方法，通过使用浓度逐步升高含有恩曲替尼药液的培养基对肺癌细胞进行冲击培养，逐步提高细胞的耐药能力，获得恩曲替尼的耐药肺癌细胞；并将耐药细胞应用到药物研究中，具有较好的研究利用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 恩曲替尼 耐药 肺癌 细胞系 建立 方法 及其 医药 研究 中的 应用 | ||
【主权项】：
1.一种恩曲替尼耐药肺癌细胞系的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：以含胎牛血清的RPMI‑1640培养基培养肺癌细胞，所述肺癌细胞的密度达到50％‑65％，用恩曲替尼药液浓度为0.45‑0.6μmol/L的培养基初诱导培养至密度达到75％‑85％，传代并用恩曲替尼药液浓度为0.45‑0.6μmol/L的培养基进行再诱导培养至所述肺癌细胞正常生长，得到第一诱导细胞；传代所述第一诱导细胞后用恩曲替尼药液浓度为1.8‑2.4μmol/L的培养基进行第一冲击诱导至细胞稳定生长并传代，得到第一冲击细胞；用恩曲替尼药液浓度为3.6‑4.5μmol/L的培养基对所述第一冲击细胞进行第二冲击诱导至细胞稳定生长并传代，得到第二冲击细胞；用恩曲替尼药液浓度为9.5‑11.8μmol/L的培养基对所述第二冲击细胞进行第三冲击诱导至细胞稳定生长并传代，得到第三冲击细胞；用恩曲替尼药液浓度为14.2‑15.5μmol/L的培养基对所述第三冲击细胞进行第四冲击诱导至细胞稳定生长并传代，得到第四冲击细胞；用恩曲替尼药液浓度为28.8‑30.6μmol/L的培养基对所述第四冲击细胞进行终冲击诱导至细胞稳定生长并传代，得到恩曲替尼耐药的肺癌细胞。
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