[发明专利]一种用于蛋白质组学分析的罗汉果叶片总蛋白质的提取方法在审
| 申请号： | 201910155319.4 | 申请日： | 2019-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN109734771A | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 朱诚;胡铭周;杨慧;周莲;王秉 | 申请（专利权）人： | 浙江理工大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14 |
| 代理公司： | 杭州永航联科专利代理有限公司 33304 | 代理人： | 侯兰玉 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物领域，公开了一种用于蛋白质组学分析的罗汉果叶片总蛋白质的提取方法，包括：S1将经过预处理的罗汉果叶片粉末与蛋白质提取液混合，静置，离心，取下层沉淀；S2将沉淀经冷冻干燥后粉碎得到沉淀粉末，保存备用；S3将沉淀粉末与蛋白质裂解液混合，裂解，得罗汉果叶片裂解溶液；S4将罗汉果叶片裂解溶液离心，取上层清液，干燥即得罗汉果叶片总蛋白质。本发明方法能够解决传统的酚提取法提取植物叶片蛋白质产生时无法有效去除多酚类和盐类物质的问题，实现了罗汉果叶片总蛋白质的高效提取，获得蛋白质纯度高，可应用于蛋白质组学分析。 | ||
| 搜索关键词： | 罗汉果 叶片 总蛋白质 蛋白质组学 沉淀粉末 裂解溶液 沉淀 预处理 蛋白质裂解液 蛋白质提取液 蛋白质纯度 叶片蛋白质 高效提取 上层清液 生物领域 提取植物 盐类物质 叶片粉末 分析 传统的 多酚类 提取法 裂解 去除 下层 备用 保存 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于蛋白质组学分析的罗汉果叶片总蛋白质的提取方法，其特征在于包括以下步骤：S1：将经过预处理的罗汉果叶片粉末与蛋白质提取液混合，于‑15~‑25℃中静置，离心，取下层沉淀；所述蛋白质提取液为：每300ml蛋白质提取液中含有40‑50ml 1Mtris‑HCl，70‑80ml甘油和5‑7g聚乙烯吡咯烷酮；S2：将所述沉淀经冷冻干燥后粉碎得到沉淀粉末，保存备用；S3：将所述沉淀粉末与蛋白质裂解液混合，于‑6~‑1℃下裂解11‑13h，得罗汉果叶片裂解溶液；所述蛋白质裂解液的制备方法为：按质量比96:30‑31:6‑9:1‑2将尿素、硫脲、3‑[（3‑胆酰胺基丙基）二甲基铵基]‑1‑丙磺酸盐以及二硫苏糖醇混合均匀，加入双蒸水，于‑15~‑25℃保存备用；S4：将所述罗汉果叶片裂解溶液离心，取上层清液，干燥即得罗汉果叶片总蛋白质。
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