[发明专利]基因工程改造外泌体递送miRNA-140靶向治疗骨性关节炎的方法在审
| 申请号： | 201910155616.9 | 申请日： | 2019-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN109966506A | 公开（公告）日： | 2019-07-05 |
| 发明（设计）人： | 段莉;梁宇杰;李兴福;徐晓;王大平;夏江 | 申请（专利权）人： | 深圳市第二人民医院 |
| 主分类号： | A61K47/46 | 分类号： | A61K47/46;A61K31/7105;A61P19/02;A61P19/04;A61P29/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 马金华 |
| 地址： | 518000 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了基因工程改造外泌体递送miRNA‑140靶向治疗骨性关节炎的方法，包括以下步骤：构建软骨细胞靶向肽修饰的lamp2b重组质粒、提取软骨亲和靶向外泌体和外泌体包裹上miRNA，运载miRNA‑140；本发明实现了miRNA药物的治疗潜力，高效、组织特异性的递送药物用于治疗骨性关节炎；主要是利用靶向外泌体包裹miRNA‑140在治疗骨关节炎药物中的应用，本发明通过外泌体靶向运输miRNA‑140，能够减缓软骨组织的降解，起到抑制软骨基质分解代谢的作用，从而控制关节软骨破坏并促进软骨修复。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 基因工程改造 骨性关节炎 靶向治疗 递送 治疗骨性关节炎 关节软骨破坏 治疗骨关节炎 组织特异性 递送药物 分解代谢 软骨基质 软骨细胞 软骨修复 软骨组织 重组质粒 靶向肽 软骨 构建 降解 修饰 运载 治疗 运输 应用 | ||
【主权项】：
1.基因工程改造外泌体递送miRNA‑140靶向治疗骨性关节炎的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：构建质粒：利用携带软骨细胞的亲合肽(CAP)融合表达于外泌体膜蛋白(lamp2b)上作为靶向的基因工程化外泌体可靶向软骨细胞；步骤二：在DC细胞中表达质粒CAP‑lamp2b，筛选稳定细胞株；步骤三：利用无外泌体的培养基扩增稳定表达CAP‑lamp2b细胞，收集细胞上清液，进行差异超速离心分离获取靶向外泌体；步骤四：通过电穿孔仪把miRNA‑140电转到步骤三中所获得的靶向外泌体中，使外泌体包裹上miRNA，运载miRNA‑140；步骤五：通过关节腔注射软骨细胞靶向外泌体，从而在实现miRNA‑140靶向递送到关节软骨细胞里用于骨关节炎实验。
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