[发明专利]一种靶向B7H3的CAR-T细胞的制备方法及应用有效
| 申请号： | 201910168714.6 | 申请日： | 2019-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN109880804B | 公开（公告）日： | 2022-07-15 |
| 发明（设计）人： | 王刚;郑骏年;方琳;柴大飞;李慧忠;杜红伟;田卉 | 申请（专利权）人： | 徐州医科大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/62;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京预立生科知识产权代理有限公司 11736 | 代理人： | 朱萍 |
| 地址： | 221004 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种靶向B7H3的CAR‑T细胞的制备方法，首先准备PBMC细胞；然后将含有CAR结构的穿梭质粒LV‑B7H3、辅助质粒psPAX2和包膜质粒VSV‑G共转染293T细胞后，得到包装的B7H3‑CAR病毒；接着取PBMC细胞，采用anti‑human CD3和anti‑human CD28作为活化剂，培养活化48h后，加入B7H3‑CAR病毒进行感染，即得。该制备方案使得CAR‑T细胞IFN‑γ表达增多，细胞杀伤活性高。本发明的靶向B7H3的CAR‑T细胞对多种实体瘤细胞具有杀伤作用，杀伤活性高，并且安全有效，可用于肾癌、肺癌以及肝癌、神经胶质瘤、卵巢癌、乳腺癌等的免疫细胞治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 靶向 b7h3 car 细胞 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种靶向B7H3的CAR‑T细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)准备PBMC细胞；(2)将含有CAR结构的穿梭质粒LV‑B7H3、辅助质粒psPAX2和包膜质粒VSV‑G共转染293T细胞后，得到包装的B7H3‑CAR病毒；(3)取PBMC细胞，采用anti‑human CD3和anti‑human CD28作为活化剂，培养活化48h后，加入步骤(2)制得的B7H3‑CAR病毒进行感染，得到靶向B7H3的CAR‑T细胞。
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