[发明专利]一种改良的亚稳定态牛呼吸道合胞病毒融合前体F蛋白质及编码的DNA分子和其应用

摘要

本发明属于生物技术领域，公开了一种经过基因改良的亚稳定态的牛呼吸道合胞病毒融合前体F蛋白质、编码的DNA分子及其应用。本发明将结构生物学的方法应用到疫苗设计和改良中，通过对牛呼吸道合胞病毒F蛋白质三维结构的观察，发现其发生构象变化的生物学机制。在F蛋白质三维结构的基础上进行抗原设计和基因工程改造，获得保持在亚稳定态F蛋白质融合前体的牛呼吸道合胞病毒F蛋白质疫苗。在此蛋白质疫苗基础上进行基因工程改造，构建可以在细胞表面表达牛呼吸道胞合体病毒F蛋白融合前体蛋白质的质粒做为DNA疫苗，使接受免疫动物获得良好的保护。通过分子生物学，生物学，细胞生物学，免疫学的方法确定了疫苗的稳定性，有效性和安全性。

主权项

1.一种牛呼吸道合胞病毒F蛋白的融合前体蛋白，包含至少一处选自下组的对野生型F蛋白的改造：A、增加F蛋白三聚体每个单体内部以及单体之间二硫键的连接数量；B、突变F蛋白三聚体内部至少一个氨基酸，将侧链较小的氨基酸突变成为侧链较大的氨基酸或增加内部的疏水结合；C、突变剔除至少一个蛋白酶的酶切位点；D、切除F蛋白三聚体至少一个动态较大氨基酸，代之以较短的连接肽；E、延长F‑蛋白质的C‑终端阿尔法(α)螺旋构造。