[发明专利]一种提高重组枯草芽孢杆菌合成N-乙酰氨基葡萄糖效率的方法

摘要

本发明公开了一种提高重组枯草芽孢杆菌合成N‑乙酰氨基葡萄糖效率的方法，属于遗传工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌自身功能膜微域FMMs为空间支架，以双质粒系统形式将FMMs定位功能结构域SPFH domain分别与氨基葡萄糖‑6‑磷酸合成酶GlmS和氨基葡萄糖‑6‑磷酸乙酰化酶GNA1进行融合表达，并通过一对工具小肽CC‑Di‑A和CC‑Di‑B调控GlmS与GNA1之间的化学计量比。在摇瓶发酵过程中，对照菌株的乙酰氨基葡萄糖的产量仅为1.97g/L，而G1:N2的乙酰氨基葡萄糖产量增加至6.15g/L，是对照菌株的3.12倍。本发明的重组枯草芽孢杆菌构建方法简单，便于使用，具有很好的应用前景。

主权项

1.一种提高重组枯草芽孢杆菌合成N‑乙酰氨基葡萄糖效率的方法，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌以枯草芽孢杆菌自身的功能膜微域FMMs作为空间支架，融合表达FMMs定位功能结构域SPFH domain、氨基葡萄糖‑6‑磷酸合成酶GlmS与氨基葡萄糖‑6‑磷酸乙酰化酶GNA1，并以工具小肽CC‑Di‑A和CC‑Di‑B分别调控氨基葡萄糖‑6‑磷酸合成酶GlmS与氨基葡萄糖‑6‑磷酸乙酰化酶GNA1，使GlmS与GNA1的化学计量比为1:1～3；所述CC‑Di‑A的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述CC‑Di‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。