[发明专利]无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用在审
申请号: | 201910190287.1 | 申请日: | 2019-03-13 |
公开(公告)号: | CN109917136A | 公开(公告)日: | 2019-06-21 |
发明(设计)人: | 陈玉平;陈芳芳;王布强;孙玲 | 申请(专利权)人: | 江苏力博医药生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214400 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用,它包括洗涤、配制。质控和处理等多个步骤。本发明无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用,可以及时检测出是否含有不规则抗体,从而避免引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的发生。 | ||
搜索关键词: | 无花果 红细胞 抗体筛选 酶处理 制备 应用 新生儿溶血病 不规则抗体 输血反应 溶血性 质控 洗涤 配制 检测 | ||
【主权项】:
1.一种无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用,其特征在于:所述制备方法及应用包括以下几个步骤:(1)待处理的筛选红细胞用盐水分别洗涤3次(2)无花果酶配制(1%wt/vol)称量无花果酶1g,加pH7.3的PBS100ml,室温搅拌15分钟,离心除去不溶物,分装1ml/瓶,‑20℃以下保存,有效期1年,解冻后1小时内使用(3)试剂无花果酶:1%无不规则抗体的血浆:10‑12人份抗‑Fya:效价≥16Fy(a+b‑)RBCs:0.25ml压积RBCs,盐水洗涤3次10mM PBS pH7.3(4)酶浓度质控a、于37℃用酶处理Fy(a+b‑)RBCs15min。用抗‑Fya检测处理好于Fy(a+b‑)RBCs,如果Fy(a+b‑)RBCs反应仍然阳性,则通过增加37℃处理时间(一分钟为一台阶,逐步提升)后继续检测b、按照上述处理酶筛选红细胞,并用无不规则抗体血浆检测如果出现阳性,则降低上述酶处理的时间,1分钟为一阶段,直到与无意外抗体的血浆反应阴性且Fya抗原失活为止(5)处理程序a、用9份pH7.3PBS稀释1份1%无花果酶b、将0.1ml压积RBC和0.5ml稀释后的无花果酶混合c、37℃孵育到设定的时间(15min)d、盐水洗涤红细胞3次e、用红细胞保存液稀释红细胞至所需浓度2‑8℃保存72小时f、检测。
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