[发明专利]一种简单高效的单克隆抗体的纯化方法在审
申请号: | 201910197627.3 | 申请日: | 2019-03-15 |
公开(公告)号: | CN109762061A | 公开(公告)日: | 2019-05-17 |
发明(设计)人: | 李怀超;李雪娇;张朔;曹启江;张敏;唐琳;刘畅;周艳楠;赵洪礼;何向东;何伟 | 申请(专利权)人: | 辽宁何氏医学院 |
主分类号: | C07K16/00 | 分类号: | C07K16/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18 |
代理公司: | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 | 代理人: | 金春华 |
地址: | 110163 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明涉及一种简单高效的单克隆抗体的纯化方法,所述纯化方法包括:对含有单克隆抗体的样品进行粗提纯;对所述粗提纯的产物进行透析;利用HPLC法对所述透析的产物进行纯化,其中,所述纯化采用阴离子交换介质,以流动相A和流动相B为洗脱液,流速为1~3ml/min,利用梯度洗脱模式进行洗脱,柱温35~40℃,检测波长280nm;所述流动相A为三羟甲基氨基甲烷缓冲液,所述流动相B为三羟甲基氨基甲烷缓冲液和氯化钠的混合溶液。本发明提供的单克隆抗体的纯化方法简单易行,蛋白回收率高、重复性好,适用于批量制备单克隆抗体。 | ||
搜索关键词: | 单克隆抗体 流动相 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 提纯 透析 氯化钠 阴离子交换介质 蛋白回收率 混合溶液 批量制备 梯度洗脱 洗脱液 波长 洗脱 柱温 检测 | ||
【主权项】:
1.一种简单高效的单克隆抗体的纯化方法,其特征在于,包括:对含有单克隆抗体的样品进行粗提纯;对所述粗提纯的产物进行透析;利用HPLC法对所述透析的产物进行纯化,其中,所述纯化采用阴离子交换介质,以流动相A和流动相B为洗脱液,流速为1~3mL/min,利用梯度洗脱模式进行洗脱,柱温35~40℃,检测波长280nm;所述流动相A为三羟甲基氨基甲烷缓冲液,所述流动相B为三羟甲基氨基甲烷缓冲液和氯化钠的混合溶液。
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