[发明专利]一种促进人多能干细胞定向分化为内皮细胞的方法有效
| 申请号： | 201910197934.1 | 申请日： | 2019-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN109797132B | 公开（公告）日： | 2021-06-01 |
| 发明（设计）人： | 胡士军;雷伟;杨壮壮;赵振奥 | 申请（专利权）人： | 苏州大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 冯瑞 |
| 地址： | 215000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种促进人多能干细胞定向分化为内皮细胞的方法，本发明的方法包括：第0～1天，使用添加4～8μM的GSK3I的CDM3分化培养基对细胞密度达到95％以上的人多能干细胞进行诱导分化；第2天，使用添加40～60ng/ml bFGF的CDM3分化培养基对上一步诱导培养后的细胞进一步诱导分化；第3～5天，使用添加40～60ng/ml VEGF和20～30ng/ml BMP4的CDM3分化培养基对上一步诱导培养后的细胞进一步诱导分化；第6天对上一步诱导培养后的细胞进行消化，然后采用内皮细胞培养基继续培养3～4天。本发明分化内皮细胞的方法更加的经济有效，分化过程更加方便快捷；分化过程中不使用血清，排除多种因素的干扰，并且分化结果更可靠；且添加RA可以促进内皮分化的效率，一次分化可以得到更多的内皮细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 促进 多能 干细胞 定向 化为 内皮 细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.一种促进人多能干细胞定向分化为内皮细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)在第0～1天，使用添加4～8μM GSK3I的CDM3分化培养基，对细胞密度达到95％以上的人多能干细胞进行诱导分化；(2)在第2天，使用添加40～60ng/ml bFGF的CDM3分化培养基对步骤(1)诱导培养后的细胞进行进一步诱导分化；(3)在第3～5天，使用添加40～60ng/ml VEGF和20～30ng/ml BMP4的CDM3分化培养基对步骤(2)诱导培养后的细胞进行进一步诱导分化；(4)在第6天，添加细胞消化酶对步骤(3)诱导培养后的细胞进行消化，然后将消化后得到的细胞采用内皮细胞培养基继续培养3～4天；所述的CDM3培养基中含有RPMI‑1640基础培养基、双抗、牛血清白蛋白和抗坏血酸。
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