[发明专利]一种固定化壳聚糖酶及其载体的制备方法在审
申请号: | 201910210466.7 | 申请日: | 2019-03-20 |
公开(公告)号: | CN109943557A | 公开(公告)日: | 2019-06-28 |
发明(设计)人: | 阳文静;游清徽;蔡险峰;徐贤柱;王曼莹 | 申请(专利权)人: | 江西师范大学 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14 |
代理公司: | 南昌市平凡知识产权代理事务所 36122 | 代理人: | 马彩凤 |
地址: | 330100 *** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | 本发明提供了一种固定化壳聚糖酶及其载体的制备方法,载体制备方法包括以下步骤:先将纳米二氧化钛加入无水乙醇中分散均匀,再加入3‑氨基丙基三乙氧基硅烷作为氨基化试剂,冰乙酸作为催化剂,搅拌反应、离心,所得沉淀用无水乙醇反复洗涤除去残留试剂,最后真空干燥,制备得到氨基化修饰纳米二氧化钛;再加入戊二醛中反应、离心,所得沉淀用蒸馏水反复洗涤除去未反应的戊二醛,最后真空干燥,制备得到固定化壳聚糖酶载体。将上述制备得到的固定化壳聚糖酶载体与壳聚糖酶加入到碳酸盐缓冲液中,避光搅拌反应、离心,所得沉淀用蒸馏水反复洗涤,除去所述固定化壳聚糖酶载体表面吸附的游离酶,最后冷冻干燥,制备得到固定化壳聚糖酶。 | ||
搜索关键词: | 壳聚糖酶 固定化 制备 反复洗涤 蒸馏水 沉淀 纳米二氧化钛 搅拌反应 无水乙醇 戊二醛 氨基丙基三乙氧基硅烷 碳酸盐缓冲液 载体表面吸附 氨基化试剂 氨基化修饰 残留试剂 分散均匀 载体制备 冰乙酸 游离酶 催化剂 避光 | ||
【主权项】:
1.一种固定化壳聚糖酶载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、对纳米二氧化钛进行氨基化修饰:先将纳米二氧化钛加入无水乙醇中分散均匀,再加入3‑氨基丙基三乙氧基硅烷作为氨基化试剂,冰乙酸作为催化剂,搅拌反应、离心,所得沉淀用无水乙醇反复洗涤除去残留试剂,最后真空干燥,制备得到氨基化修饰纳米二氧化钛;S2、对氨基化修饰纳米二氧化钛进行戊二醛活化:将步骤S1制备得到的氨基化修饰纳米二氧化钛加入浓度为0.5‑5%的戊二醛中反应、离心,所得沉淀用蒸馏水反复洗涤除去未反应的戊二醛,最后真空干燥,制备得到固定化壳聚糖酶载体。
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