[发明专利]一种天山雪莲愈伤组织的悬浮培养方法在审
| 申请号： | 201910254908.8 | 申请日： | 2019-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN110178725A | 公开（公告）日： | 2019-08-30 |
| 发明（设计）人： | 郑玉忠;陈芸;张振霞;林敏;丁黛灵;杜颖青;董婷霞;詹华强 | 申请（专利权）人： | 韩山师范学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 | 代理人： | 许羽冬 |
| 地址： | 521000*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及植物组织培养领域，具体是指一种天山雪莲愈伤组织的悬浮培养方法，包括培养无菌苗、诱导愈伤组织、高压灭菌、悬浮培养愈伤组织、干燥五个步骤，是一种规模化生产天山雪莲培养物的方法，可在保证绿原酸和紫丁香苷含量的基础上，稳定高产天山雪莲培养物；利用液体培养基进行悬浮培养，不仅可以扩大愈伤组织的数量，还能有效缩短时间。 | ||
| 搜索关键词： | 天山雪莲 悬浮培养 愈伤组织 培养物 诱导愈伤组织 植物组织培养 规模化生产 液体培养基 高压灭菌 紫丁香苷 绿原酸 无菌苗 高产 保证 | ||
【主权项】：
1.一种天山雪莲愈伤组织的悬浮培养方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)培养无菌苗：将天山雪莲种子做灭菌处理，将无菌种子用25℃的无菌水浸泡24h，接种在湿润的、无菌的、带滤纸的培养皿中萌发；(2)诱导愈伤组织：将无菌苗的叶、根和茎转接至添加有植物激素的MS培养基上，在培养室诱导愈伤组织生长；(3)高压灭菌：将装有25～50mL无菌悬浮培养液的锥形瓶，在120℃温度下高压灭菌16～18min；(4)悬浮培养愈伤组织：将雪莲愈伤组织剪碎成颗粒，置于无菌悬浮培养液的锥形瓶中，然后放在摇床中，在转速为80～110r/min、温度为23～27℃、光照为8～14h/d的条件下培养15～25天，然后更换新的15～100mL悬浮培养液，继续培养10～30天；(5)干燥：培养结束后，过滤分离得到愈伤组织，用蒸馏水洗2遍以上，置于30～55℃烘箱中烘干至恒重，即得干燥愈伤组织。
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