[发明专利]微滴式数字PCR隐匿性乙肝病毒检测试剂盒

摘要

本发明提供一种微滴式数字PCR隐匿性乙肝病毒检测试剂盒，其试剂盒包括数字PCR反应液、引物探针组合，所述引物探针组合选自S基因区引物探针组合、C基因区引物探针组合中的至少一种。本发明通过在乙肝病毒S、C保守序列分别设计引物探针，运用双重双基因数字PCR技术对HBV DNA进行同管同时检测，操作简便，快速，提高隐匿性乙肝病毒检测方法的灵敏度、特异性，尽可能的降低因突变导致假阴性结果发生的几率，并且能进一步提高检测效率。

主权项

1.一种双重双基因微滴式数字PCR乙肝病毒定量检测试剂盒，其特征在于：包括数字PCR反应液、引物探针组合，所述引物探针组合选自S基因区引物探针组合、C基因区引物探针组合中的至少一种，所述S基因区引物探针组合具体选自如下组合中的任意一种：组合S1：含有如SEQ ID NO.1所示序列的上游引物：TGCCCGTTTGTCCTCTAATTCC(SEQ ID NO.1)；含有如SEQ ID NO.2所示序列的下游引物：AGGTGCAGTTTCCATCCATAGG(SEQ ID NO.2)；含有如SEQ ID NO.3所示序列的探针：TCATCAACCACCAGCACGGGACCA(SEQ ID NO.3)；组合S2：含有如SEQ ID NO.4所示序列的上游引物：TTGCCCGTTTGTCCTCTAATTC(SEQ ID NO.4)；含有如SEQ ID NO.5所示序列的下游引物：CATCCATAGGTTTTGTACAGCAAC(SEQ ID NO.5)；含有如SEQ ID NO.6所示序列的探针：AGGATCATCAACCACCAGCACGGG(SEQ ID NO.6)；组合S3：含有如SEQ ID NO.7所示序列的上游引物：GTGTCTGCGGCGTTTATCA(SEQ ID NO.7)；含有如SEQ ID NO.8所示序列的下游引物：CCCGTTTGTCCTCTAATTCCAG(SEQ ID NO.8)；含有如SEQ ID NO.9所示序列的探针：TTCCTCTGCATCCTGCTGCTATGCC(SEQ ID NO.9)；所述C基因区引物探针组合具体选自如下组合中的任意一种：组合C1：含有如SEQ ID NO.10所示序列的上游引物：ATCAACACTTCCGGAAACTACTG(SEQ ID NO.10)；含有如SEQ ID NO.11所示序列的下游引物：TTCCCGAGATTGAGATCTTCTGC(SEQ ID NO.11)；含有如SEQ ID NO.12所示序列的探针：GGCAGGTCCCCTAGAAGAAGAACT(SEQ ID NO.12)；组合C2：含有如SEQ ID NO.13所示序列的上游引物：AGCCTTAAAATCTCCTGAGCATTG(SEQ ID NO.13)；含有如SEQ ID NO.14所示序列的下游引物：CAAATTATTACCCACCCAGGTAGC(SEQ ID NO.14)；含有如SEQ ID NO.15所示序列的探针：TCACCACACAGCACTCAGGCAAGC(SEQ ID NO.15)；组合C3：含有如SEQ ID NO.16所示序列的上游引物：AGGCAGGTCCCCTAGAAGAAG(SEQ ID NO.16)；含有如SEQ ID NO.17所示序列的下游引物：ACATTGGGATTCCCGAGATTGAG(SEQ ID NO.17)；含有如SEQ ID NO.18所示序列的探针：ACTCCCTCGCCTCGCAGACGAAGG(SEQ ID NO.18)；上述各探针还包括荧光染料和荧光淬灭剂。