[发明专利]一种胆固醇氧化酶及其应用

摘要

本发明公开了一种胆固醇氧化酶及其应用，属于酶工程技术领域。本发明首先构建得到胆固醇氧化酶的基因工程菌E.coli BL21(DE3)‑pET20b(+)‑COD，其发酵所得的粗酶液中胆固醇氧化酶酶活高达700U·L‑1，纯化得到的胆固醇氧化酶比酶活为18.5U·mg‑1，其分子量约60,000kDa，该胆固醇氧化酶具有良好的温度耐受性和有机溶剂耐受性。利用工程菌发酵液制备胆甾‑4‑烯‑3‑酮和胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮，在有机相为甲苯的两相转化体系中，以胆固醇为底物制备胆甾‑4‑烯‑3‑酮的转化率为30％；制备胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮的转化率为45％。

主权项

1.一种胆固醇氧化酶，其特征在于，含有下述氨基酸序列：(a)SEQ ID NO.1所示；或者，(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有胆固醇氧化酶活性的由(a)衍生的蛋白质。