[发明专利]一种定量总脂含量的分光光度法及应用

摘要

本发明公开了一种定量总脂含量的分光光度法及应用，依据脂质对酞菁聚集体的解聚机制，以四仲辛氧基镍酞菁为比色材料，石油醚为溶剂，准确定量总脂含量。分三步：(1)制作标准曲线。配制特定浓度酞菁溶液，以压榨花生油为标准脂质，无油样溶液为参照，在675nm分析，拟合吸光度和花生油浓度之间的坐标点，得线性方程。(2)脂质萃取。称量待分析样品，经萃取、蒸除溶剂和称量，回收脂质。(3)总脂定量。取酞菁溶液2.5mL，与0.5mL回收脂样混合，以无脂样溶液为参照，在特征波长下分析，去掉同体积脂样的吸收，代入线性方程，计算脂浓度，及相应的脂质量和总脂含量。与传统的萃取/称重法相比，该法更准确，能避免回收样中残留溶剂的影响。

主权项

1.一种定量总脂含量的分光光度法及应用，其特征在于：依据取代酞菁在小分子烷烃类溶剂中的分散特性，通过大分子油脂调剂其聚集体的解离平衡，以增强酞菁分子的特征吸收。上述特征吸收的增加值与混入检测溶液的脂质质量浓度在一定的浓度范围内呈线性关系。这种线性关系可以选用特定酞菁浓度和标准脂质进行确定，得出标准曲线和线性方程。利用该线性方程，可以进行定量分析生物样品。称取待分析的样品，先进行溶剂萃取，然后蒸除溶剂，称量回收脂样，脂样在特定的酞菁溶液中稀释，并检测其特征吸收。由此，可以计算脂质的浓度，进而计算脂质在回收样品中的质量及总脂含量。该分光光度法，相对于传统的称重方法，能够避免回收样品中溶剂的干扰，分析结果更准确。其方法要点如下：(1)检测溶液的体积恒定为3mL，溶液中酞菁的浓度恒定。以无脂质的酞菁溶液为参照，在酞菁的特征吸收波长下，进行分析。根据检测溶液中混入标准脂质的浓度和吸收之间的关系，可在一定脂质浓度范围内，做出直线，得到一个线性方程。(2)待测样品经溶剂萃取，溶剂蒸除和样品称重后，回收的脂样取样0.5mL进行称重和如下的分光光度分析。(3)上述0.5mL的脂样加入2.5mL酞菁溶液中，混合后，在特征波长下分析，去掉参照体系无油脂酞菁溶液的吸收，以及0.5mL油样的吸收，即是油脂所致酞菁增加的特征吸收。带入上述方程，计算油脂的浓度，并计算油样的质量及总脂含量。